人IL-37在大肠杆菌表达及多克隆抗体的制备与鉴定北大核心CSCD |
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引用本文: | 赵付前,何素辉,何玲鸽,林妙芬,王森,陈章权.人IL-37在大肠杆菌表达及多克隆抗体的制备与鉴定北大核心CSCD[J].细胞与分子免疫学杂志,2014(5):513-516. |
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作者姓名: | 赵付前 何素辉 何玲鸽 林妙芬 王森 陈章权 |
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作者单位: | 1.广东医学院广东省医学分子诊断重点实验室523808;2.广东医学院临床免疫学教研室523808; |
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基金项目: | 广东省自然科学基金(S2012040006383);广东省大学生创新训练计划(1057113038) |
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摘 要: | 目的原核表达白细胞介素37(IL-37)及制备其多克隆抗体。方法 PCR扩增IL-37b成熟肽编码区基因,克隆至表达载体pET28a,转化大肠杆菌感受态细胞,IPTG诱导表达,Ni2+-NTA琼脂糖凝胶柱亲和层析纯化重组蛋白,以纯化的重组蛋白IL-37为免疫原免疫BALB/c小鼠制备其特异性抗体,用ELISA、Western blot法和免疫组织化学染色检测抗体的效价和特异性。结果原核表达了重组蛋白IL-37b成熟肽,并获得高效价的小鼠抗IL-37抗体,能特异性识别天然的IL-37抗原。结论成功制备效价高、特异性好的小鼠抗IL-37抗体。
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关 键 词: | 白细胞介素37 表达 抗体 制备 小鼠 |
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