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miR-126-5p靶向Notch2 对结肠癌SW480 细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响
作者姓名:王艳良  陈涛
作者单位:1.海南省儋州市人民医院 普外科,海南 儋州 571700;2. 包头医学院第一附属医院 普外科,内蒙古包头014000
基金项目:海南省医药卫生科研基金资助项目(No. 15A200264)
摘    要:目的:探讨miR-126-5p 对结肠癌SW480 细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响及其作用机制。方法:用miR-126 mimic和pcDNA Notch2(pc-Notch2)等分别或同时转染结肠癌SW480 细胞,用qPCR法检测miR-126-5p 和Notch2 的表达;荧光素酶报告实验观察miR-126-5p 和Notch2 的靶向关系;CCK-8 法、划痕愈合实验、Transwell 小室法和Annexin V/PI 染色流式细胞术分别检测转染细胞的增殖、迁移、侵袭和凋亡,Western blotting 检测Notch2、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)、cleaved Caspase-3、MMP-2 和MMP-9 的表达。结果:转染miR-126 mimic 能显著升高SW480 细胞miR-126-5p 的表达水平(P<0.01)和显著抑制SW480 细胞Notch2 的表达(P<0.01),同时证实Notch2 上存在miR-126-5p 的结合位点。上调miR-126-5p 显著抑制SW480 细胞增殖并降低PCNA的表达水平(P<0.01)、升高细胞凋亡率和cleaved Caspase-9 的表达水平(均P<0.01),pc-Notch2显著减弱miR-126 mimic 对SW480 细胞增殖和凋亡的调控作用;miR-126 mimic 显著降低SW480 细胞划痕愈合率和穿膜细胞数(均P<0.01)、抑制MMP-2 和MMP-9 的表达(P<0.01);pc-Notch2 显著减弱miR-126 mimic 对SW480 细胞迁移、侵袭及MMP-2、MMP-9表达的抑制作用(均P<0.01)。结论:miR-126-5p 通过抑制Notch2 表达,降低结肠癌SW480 细胞增殖、迁移和侵袭能力。

关 键 词:结肠癌  SW480 细胞  miR-126-5p  Notch2  增殖  凋亡
收稿时间:2018-07-24
修稿时间:2018-09-04
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