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PC12细胞氧糖剥夺/再灌注损伤中自噬与凋亡现象
引用本文:董琳,童煜,毛萌.PC12细胞氧糖剥夺/再灌注损伤中自噬与凋亡现象[J].实用儿科临床杂志,2012,27(18):1397-1401.
作者姓名:董琳  童煜  毛萌
作者单位:1. 四川大学华西第二医院儿科,成都610041;四川大学华西第二医院西部妇幼医学研究院早期发育与损伤实验室,成都610041
2. 四川大学华西第二医院西部妇幼医学研究院早期发育与损伤实验室,成都,610041
3. 四川大学华西第二医院儿科,成都610041;四川大学华西第二医院西部妇幼医学研究院早期发育与损伤实验室,成都610041;妇儿疾病与出生缺陷教育部重点实验室,成都610041
基金项目:国家自然科学基金,长江学者和创新团队发展计划
摘    要:目的观察氧糖剥夺/再灌注(OGD/OGD-R)诱导大鼠嗜铬细胞瘤细胞PC12细胞自噬和凋亡的发生及进展。方法PC12细胞经氧糖剥夺及再灌注处理建立OGD/OGD-R模型,在处理不同时间点,应用流式细胞仪检测OGD组及OGD-R组细胞活性和凋亡率;Western blot法检测自噬相关蛋白LC3、Beclin 1表达;免疫荧光法观察自噬小体;分别使用自噬上下游抑制剂(3-甲基腺嘌呤、E64 d+pepstatin A)进行调控,观察自噬的波动。结果随着氧糖剥夺时间的延长,OGD组细胞形态损伤逐步加重,凋亡率显著增高,呈时间依赖性;OGD-R组早期细胞活性略有恢复,随着再灌注时程的延长,细胞凋亡率逐渐增高。自噬相关蛋白LC3Ⅱ在OGD短暂处理后其表达即有上升,3 h左右达到峰值,6~8 h恢复到基础水平;Beclin 1蛋白呈先上升后平稳下降趋势。OGD 3 h时间点诱导自噬合并3-甲基腺嘌呤处理后自噬体减少明显;而E64 d+pepstatin A可导致LC3Ⅱ的积聚。OGD-R阶段LC3Ⅱ进一步升高至再灌注12 h后开始下降,Beclin 1蛋白表达呈升高趋势并持续至再灌注24 h。结论 OGD/OGD-R均能激活PC12细胞自噬与凋亡,可为探索自噬与凋亡间潜在的串流奠定基础。

关 键 词:自噬  凋亡  PC12  氧糖剥夺  再灌注

Autophagy and Apoptosis in PC12 Cells Injury Induced by Oxygen and Glucose Deprivation/Reperfusion
DONG Lin , TONG Yu , MAO Meng.Autophagy and Apoptosis in PC12 Cells Injury Induced by Oxygen and Glucose Deprivation/Reperfusion[J].Journal of Applied Clinical Pediatrics,2012,27(18):1397-1401.
Authors:DONG Lin  TONG Yu  MAO Meng
Affiliation:1,2,3(1.Department of Pediatrics,West China Second Hospital,Sichuan University,Chengdu 610041,Sichuan Province,China;2.Laboratory of Early Development and Injuries,West China Institutes for Woman and Children′s Health,West China Second University Hospital,Sichuan University,Chengdu 610041,Sichuan Province,China;3.Key Laboratory of Obstetric & Gynecologic and Pediatric Diseases and Birth Defects of Ministry of Education,Chengdu 610041,Sichuan Province,China)
Abstract:
Keywords:
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