应激性心肌损伤发病机制的实验研究

目的 探讨应激性心肌损伤的发病机制.方法 30只雄性Wistar大鼠按随机数字表法分成正常对照组、制动后冰泳应激组(每日制动6h,第13日开始制动后冰泳5 min)、内毒素组腹腔注射脂多糖(LPS)10 mg/kg]3组,每组10只.取心肌组织,光镜下观察心肌组织病理变化;电镜下观察心肌超微结构;用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)含量;用原位末端缺刻标记法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡并计算凋亡指数;用免疫组化法检测心肌组织天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(caspase-8和caspase-3)的表达;并分析caspase与细胞凋亡指数的相关性.结果 与正常对照组相比,制动冰泳应激组和内毒素应激组在光镜和电镜下均有不同程度的心肌细胞损伤表现,血清cTnI含量(μg/L)均明显增加(0.63±0.12、0.74±0.08比0.53±0.03,P＜0.05和P＜0.01);心肌细胞凋亡指数有不同程度增加(7.91±1.71 )％、(12.94±2.00)％比0],心肌组织中caspase-8和caspase-3表达增加(caspase-8灰度值:126.65±3.13、114.82±8.67比156.99±9.66; caspase-3灰度值:130.20±2.96、108.58±5.72比160.51±5.25,均P＜0.01),且内毒素应激组各指标均明显高于制动冰泳应激组(P＜0.05或P＜0.01).相关分析显示,制动冰泳应激组中caspase-8、caspase-3与细胞凋亡指数呈显著正相关(r=0.914,P1=0.002;r2=0.929,P2=0.001);内毒素应激组中caspase-8、caspase-3与细胞凋亡指数呈显著正相关(r1=0.956,P1 =0.000;r2=0.916,P2=0.001).结论 应激可能通过增加caspase-8和caspase-3蛋白的表达诱导大鼠心肌细胞凋亡,从而导致心肌损伤.

Study on the pathogenesis of stress myocardial injury