| L-鼠李树胶糖激酶在D-阿洛酮糖合成中的应用 |
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| 引用本文： | 温俊婷,李子杰,高晓冬.L-鼠李树胶糖激酶在D-阿洛酮糖合成中的应用[J].食品与生物技术学报,2020,39(12):49-56. |
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| 作者姓名： | 温俊婷 李子杰 高晓冬 |
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| 作者单位： | 江南大学 生物工程学院，江苏 无锡 214122; 江南大学 糖化学与生物技术教育部重点实验室，江苏 无锡214122 |
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| 摘 要： | D-阿洛酮糖-3-差向异构酶（D-psicose-3-epimerase，DPE）可以催化D-果糖和D-阿洛酮糖之间的可逆反应，但D-阿洛酮糖的产率较低。L-鼠李树胶糖激酶（L-rhamnulose kinase，RhaB）具有磷酸化酮糖类物质的活性，将其与DPE偶联，可以打破DPE的可逆平衡，从而提高D-阿洛酮糖的产率。在反应体系中引入多聚磷酸盐激酶（polyphosphate kinase，PPK），可实现ATP的再生，降低反应的成本。本实验在大肠杆菌Rosetta（DE3）中分别过表达DPE、RhaB和PPK，优化其反应条件，计算产物得率。结果表明，RhaB的相对分子质量约为5.3×104，最适pH和温度为8.0和35 ℃。将DPE和RhaB偶联，最适条件如下：pH 8.5，温度35 ℃，最适金属离子Mg2+，DPE和RhaB酶量比（质量比）1∶2，产物得率为70%。将DPE、RhaB和PPK偶联，ATP浓度降为D-果糖的1/5，D-阿洛酮糖得率为50%。本研究为工业化生产D-阿洛酮糖提供理论依据。
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| 关 键 词： | D-阿洛酮糖 L-鼠李树胶糖激酶 D-阿洛酮糖-3-差向异构酶 多聚磷酸盐激酶 |
Application of L-rhamnulose Kinase on Production of D-psicose |
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| WEN Junting,LI Zijie,GAO Xiaodong.Application of L-rhamnulose Kinase on Production of D-psicose[J].Journal of Food Science and Biotechnology,2020,39(12):49-56. |
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| Authors: | WEN Junting LI Zijie GAO Xiaodong |
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| Affiliation: | School of Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi 214122, China; Key Laboratory of Carbohydrate Chemistry and Biotechnology, Ministry of Education, Jiangnan University, Wuxi 214122, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | D-psicose L-rhamnulose kinase D-psicose-3-epimerase polyphosphate kinase |
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