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| 抑制LSD1对hiPSCs向定型内胚层分化的调控作用 | |
| 引用本文： | 周淑艳,李富荣,闫红杰,李阳,杨晓菲,张根葆.抑制LSD1对hiPSCs向定型内胚层分化的调控作用[J].中国病理生理杂志,2018,34(10):1811-1819. |
| 作者姓名： | 周淑艳 李富荣 闫红杰 李阳 杨晓菲 张根葆 |
| 作者单位： | 1. 皖南医学院病理生理学教研室, 安徽 芜湖 241002; 2. 暨南大学第二临床医学院, 深圳市人民医院, 干细胞与细胞治疗重点实验室, 广东 深圳 518020 |
| 基金项目： | 安徽省教育厅自然科学基金重点项目（No.KJ2015A207）；皖南医学院博士科研启动基金资助项目（No.WK2014RC06） |
| 摘 要： | 目的:探讨抑制组蛋白赖氨酸特异性去甲基化酶1(LSD1)对人诱导性多能干细胞(hiPSCs)向定型内胚层(DE)分化的调控作用。方法:利用LSD1抑制剂或shRNA抑制LSD1表达,观察hiPSCs形态变化并检测LSD1活性水平,CCK-8方法检测细胞增殖活性,qPCR检测hiPSCs多能性基因及各胚层标志基因的表达,IP-WB方法检测LSD1调控靶基因的复合体模式,Ch IP-qPCR方法检测DE标志基因启动子区域组蛋白H3第4位赖氨酸二甲基化和三甲基化(H3K4me2/me3)及第9位赖氨酸乙酰化(H3K9ac)水平。结果:(1)抑制LSD1可显著下调hiPSCs多能性基因OCT4、Y染色体性别决定区域盒2(SOX2)及Nanog同源盒(NANOG)的表达水平(P 0. 05);显著上调外胚层标志基因β3-微管蛋白(TUBB3),DE标志基因Y染色体性别决定区域盒17(SOX17)和叉头盒A2(FOXA2),以及中胚层标志基因骨形态发生蛋白2(BMP2)的表达水平(P 0. 05);(2)当LSD1活性为正常水平的53. 4%时利于DE分化;(3) LSD1在hiPSCs核内与组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)及阻遏物元件1沉默转录因子辅阻遏物(CoREST)以复合体的形式调控靶基因;(4)抑制LSD1后,SOX17和FOXA2基因启动子区域LSD1与HDAC1结合水平均显著下降,同时H3K4me2/me3和H3K9ac富集水平显著提高(P 0. 01)。结论:LSD1通过调控DE分化关键基因启动子区域H3K4me和H3K9ac水平来影响hiPSCs向DE的分化能力。 |
| 关 键 词： | 人诱导性多能干细胞 赖氨酸特异性去甲基化酶1 定型内胚层 RNA干扰 分化 |
| 收稿时间： | 2018-05-21 |
LSD1 inhibition regulates definitive endoderm specification in human induced pluripotent stem cells |
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| ZHOU Shu-yan,LI Fu-rong,YAN Hong-jie,LI Yang,YANG Xiao-fei,ZHANG Gen-bao.LSD1 inhibition regulates definitive endoderm specification in human induced pluripotent stem cells[J].Chinese Journal of Pathophysiology,2018,34(10):1811-1819. | |
| Authors: | ZHOU Shu-yan LI Fu-rong YAN Hong-jie LI Yang YANG Xiao-fei ZHANG Gen-bao |
| Affiliation: | 1. Department of Pathophysiology, Wannan Medical College, Wuhu 241002, China; 2. The Key Laboratory of Stem Cell and Cellular Therapy, The Second Clinical Medical College, Shenzhen People's Hospital, Jinan University, Shenzhen 518020, China |
| Abstract: | |
| Keywords: | Human induced pluripotent stem cells Lysine specific demethylase 1 Definitive endoderm RNA interference Differentiation |
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