| 玉米赤霉烯酮单克隆抗体制备及免疫分析 |
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| 引用本文： | 李沐洁,张明洲,奚茜,陈宗伦,王唯芬,龚云飞.玉米赤霉烯酮单克隆抗体制备及免疫分析[J].中国食品学报,2013(1):145-152. |
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| 作者姓名： | 李沐洁 张明洲 奚茜 陈宗伦 王唯芬 龚云飞 |
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| 作者单位： | 中国计量学院生命科学学院浙江省生物计量与检验检疫重点实验室 |
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| 基金项目： | 浙江省重大科技专项(2006C12102);杭州市重大科技创新专项(20083212A25);浙江省重点科技创新团队(2010R50028);浙江省科技成果转化项目(2011E61018);浙江省重大科技专项重点项目(2012C12013-3) |
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| 摘 要： | 采用活泼酯法将玉米赤霉烯酮(Zaralenone,ZEN)分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联合成免疫原ZEN-BSA和包被原ZEN-OVA,经紫外扫描和聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定后免疫BALB/c小鼠;挑选产生高效价和高敏感性抗体的小鼠进行抗原超强免疫,取脾细胞与SP2/0细胞融合获得1株稳定分泌抗玉米赤霉烯酮单克隆抗体的杂交瘤细胞(3D8),经鉴定,该抗体亚类为IgG1,轻链为k型。经体内诱生腹水并纯化获得效价为1∶2.048×106的单克隆抗体。建立了基于单克隆抗体的ZEN间接竞争ELISA法(ic-ELISA),该方法IC50和检出限分别为22.89pg/mL和10.07pg/mL。与α-玉米赤霉烯醇、β-玉米赤霉烯醇、玉米赤霉酮、α-玉米赤霉醇和β-玉米赤霉醇的交叉反应率分别为95%、8%、12%、6%和5%,而与黄曲霉毒素B1、呕吐毒素、伏马毒素B1和赭曲霉毒素A未见有交叉反应。在玉米、大麦、小麦和燕麦中加标的回收率在86.4%~104.8%之间。该方法灵敏特异,可作为快速检测谷物中玉米赤霉烯酮的初筛方法。
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| 关 键 词： | 玉米赤霉烯酮 单克隆抗体 间接竞争ELISA |
Preparation of Monoclonal Antibody and Detection of Zearalenone by Enzyme-linked Immunosorbent Assay |
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| Li Mujie Zhang Mingzhou Xi Xi Chen Zonglun Wang Weifen Gong Yunfei.Preparation of Monoclonal Antibody and Detection of Zearalenone by Enzyme-linked Immunosorbent Assay[J].Journal of Chinese Institute of Food Science and Technology,2013(1):145-152. |
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| Authors: | Li Mujie Zhang Mingzhou Xi Xi Chen Zonglun Wang Weifen Gong Yunfei |
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| Affiliation: | Li Mujie Zhang Mingzhou Xi Xi Chen Zonglun Wang Weifen Gong Yunfei (Zhejiang Provincial Key Laboratory of Bio-metrology, Inspection and Quarantine, Colleage of Life Science, China JiLiang University, Hangzhou 310018) |
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