| 带有不同亚型HPV L1基因片段的哺乳动物细胞克隆的建立 |
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| 引用本文： | 卓勤强,刘昕,钱春荣,刘丽莎,高玉梅.带有不同亚型HPV L1基因片段的哺乳动物细胞克隆的建立[J].第三军医大学学报,2006,28(5):469-471. |
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| 作者姓名： | 卓勤强 刘昕 钱春荣 刘丽莎 高玉梅 |
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| 作者单位： | 第三军医大学基础医学部医学遗传学教研室,重庆,400038;第三军医大学基础医学部医学遗传学教研室,重庆,400038;第三军医大学基础医学部医学遗传学教研室,重庆,400038;第三军医大学基础医学部医学遗传学教研室,重庆,400038;第三军医大学基础医学部医学遗传学教研室,重庆,400038 |
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| 摘 要： | 目的构建携带HPV亚型L1基因片段的标准细胞株.方法根据HPV通用引物GP5 /GP6 ,用重叠延伸PCR方法合成HPV亚型L1基因中约150 bp片段;插入真核细胞表达载体EGFP-N1,用脂质体转染SPC细胞,筛选以获得带有不同HPV L1基因片段细胞克隆,并用定量PCR方法确认.结果重叠延伸PCR后得到约150 bp的基因片段,测序结果经BLAST比对,分别与相应HPV亚型公开报告序列一致;将所获片段与EGFP-N1载体连接后酶切及测序鉴定正确;经筛选获得了携带HPV6、11、16、18、31、35亚型L1基因片段的细胞株;并用定量PCR方法进行了确认.结论成功构建了带有不同HPV亚型L1基因片段的30个亚克隆和6个细胞株,为进一步的HPV分型检测研究提供了保证.
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| 关 键 词： | HPV 重叠延伸 GP5+/GP6+ 定量PCR |
| 文章编号： | 1000-5404(2006)05-0469-03 |
| 修稿时间： | 2005年10月28 |
Establishment of mammalian cell cloning with different subtype HPV L1 gene fragment |
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| ZHUO Qin-qiang,LIU Xin,QIAN Chun-rong,LIU Li-sha,GAO Yu-mei.Establishment of mammalian cell cloning with different subtype HPV L1 gene fragment[J].Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae,2006,28(5):469-471. |
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| Authors: | ZHUO Qin-qiang LIU Xin QIAN Chun-rong LIU Li-sha GAO Yu-mei |
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| Keywords: | HPV GP5 /GP6 |
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