坝上长尾鸡原始生殖细胞的分离、培养与鉴定

为了研究坝上长尾鸡的原始生殖细胞(primordial germ cell,PGCs),试验分别从孵化至13~15期的坝上长尾鸡鸡胚血液和5.5 d的鸡胚生殖嵴中分离得到PGCs,接种于24孔培养板,以鸡胚成纤维细胞(CEF)为饲养层,添加细胞因子的培养体系,在温度37℃、95%空气和5%CO2培养箱中进行体外培养和传代,借助组织化学及免疫组织化学方法进行染色,并采用PAS(高碘酸希夫氏染色)、AKP(碱性磷酸酶染色)以及SSEA-1等方法进行鉴定。结果表明:PGCs集落有典型的鸟巢状结构,且PAS、AKP以及SSEA-1染色呈阳性。