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利用表面活性剂介导的方法制备AgrC蛋白脂质体
引用本文:王丽娜,权春善*,许永斌,李西会,瞿晓晶,范圣第.利用表面活性剂介导的方法制备AgrC蛋白脂质体[J].化学学报,2014,72(2):233-240.
作者姓名:王丽娜  权春善*  许永斌  李西会  瞿晓晶  范圣第
作者单位:a 中国科学院大连化学物理研究所 大连 116023; b 大连民族学院生物技术与资源利用国家民委-教育部重点实验室 大连 116600; c 大连民族学院生命科学学院 大连 116600
基金项目:国家自然科学基金(Nos.21272031,21172028)资助~~
摘    要:膜蛋白AgrC是金黄色葡萄球菌双组分信号转导系统的感受激酶. 其信号转导机制的阐明对于解决细菌耐药问题具有重要意义. 目前膜蛋白研究的主要瓶颈是难以获得大量高纯度和功能稳定的蛋白. 将目标蛋白表达在大肠杆菌体内,利用表面活性剂将其从细胞膜上溶解,纯化,这一系列步骤容易引起膜蛋白不稳定和功能损失. 本文报道了用表面活性剂介导的方法将膜蛋白AgrC镶嵌到脂质体上,即形成蛋白脂质体. 脂质体和蛋白脂质体的结构、形貌以及平均粒径分别用透射电镜和动态光散射仪表征. 蔗糖密度梯度离心的结果表明蛋白重构效率达80%. 硫醇试剂标记实验确定AgrC的细胞质域在脂质体中取向于内侧. 体外磷酸化实验表明AgrC蛋白在脂质体中的自我磷酸化活性远远高于表面活性剂中的活性,且其自我磷酸化活性在2周内几乎没有损失. 蛋白脂质体的构建不仅解决了膜蛋白的不稳定性问题,也为体外研究AgrC蛋白的结构、功能和信号转导机制提供了新的思路.

关 键 词:金黄色葡萄球菌  AgrC  表面活性剂  蛋白脂质体  膜蛋白  

Construction of AgrC Proteoliposomes by Detergent-Mediated Method
Wang Lina,Quan Chunshan,Xu Yongbin,Li Xihui,Qu Xiaojing,Fan Shengdi.Construction of AgrC Proteoliposomes by Detergent-Mediated Method[J].Acta Chimica Sinica,2014,72(2):233-240.
Authors:Wang Lina  Quan Chunshan  Xu Yongbin  Li Xihui  Qu Xiaojing  Fan Shengdi
Affiliation:a Dalian Institute of Chemical Physics, Chinese Academy of Sciences, Liaoning, Dalian 116023, China; b Key Laboratory of Biotechnology and Resource Utilization, State Ethnic Affairs Commission and Ministry of Education, Dalian Nationalities University, Liaoning, Dalian 116600, China; c Department of Life Science, Dalian Nationalities University, Dalian 116600, Liaoning, China
Abstract:
Keywords:Staphylococcus aureus  AgrC  detergent  proteoliposome  membrane protein  
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