| 黄鳝FOXL2启动子克隆和报告基因载体活性分析 |
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| 引用本文： | 朱信超,潘丽莎,李梦佳,曲宪成.黄鳝FOXL2启动子克隆和报告基因载体活性分析[J].基因组学与应用生物学,2019,38(11):4902-4909. |
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| 作者姓名： | 朱信超 潘丽莎 李梦佳 曲宪成 |
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| 作者单位： | 上海海洋大学水产与生命学院,上海,201306;上海海洋大学水产与生命学院,上海,201306;上海海洋大学水产与生命学院,上海,201306;上海海洋大学水产与生命学院,上海,201306 |
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| 基金项目： | 本研究由水产动物遗传育种中心上海市协同创新中心 |
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| 摘 要： | 本研究通过生物信息学软件预测黄鳝FOXL2 (Forkhead box L2)基因5′上游3 000 bp内的序列,通过聚合酶链反应从黄鳝的基因组DNA PCR扩增出启动子序列,并构建到PGL3-basic载体中,经KpnⅠ/HindⅢ双酶切和测序验证正确性,阳性克隆命名为pGL3-basic-FOXL2。将pGL3-basic-FOXL2和pRL-TK共转染HEK293细胞,采用双荧光素酶检测启动子活性。并采用gene-regulation.com网站的Alibaba2.1及The JASPAR database在线软件预测转录因子结合位点。结果表明成功克隆了FOXL2的启动子,荧光素酶检测结果表明启动子具有活性。同时预测了启动子上具有以下转录因子如GATA-1、Oct-1、AP-1、Sp1、C/EBPalpha、Ftz、Hb、GR、TBP、U SF、SOX9、E4、ER、RXR-beta、Pit-1a、HOX A4、HNF-1等的结合位点。为研究FOXL2参与细胞通路之间的调控研究提供了有力的工具。
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| 关 键 词： | 关FOXL2 启动子克隆 报告基因 荧光素酶 活性 |
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