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番茄煤污假尾孢叶斑病菌实时荧光定量PCR检测技术的建立及应用
引用本文:康华军,柴阿丽,石延霞,谢学文,郭建光,李宝聚.番茄煤污假尾孢叶斑病菌实时荧光定量PCR检测技术的建立及应用[J].植物保护学报,2019,46(6):1214-1221.
作者姓名:康华军  柴阿丽  石延霞  谢学文  郭建光  李宝聚
作者单位:中国农业科学院蔬菜花卉研究所, 北京 100081,中国农业科学院蔬菜花卉研究所, 北京 100081,中国农业科学院蔬菜花卉研究所, 北京 100081,中国农业科学院蔬菜花卉研究所, 北京 100081,山西省运城市盐湖区蔬菜发展中心, 运城 044000,中国农业科学院蔬菜花卉研究所, 北京 100081
基金项目:国家重点研发计划(2017YFD0200300),中国农业科学院科技创新工程(CAAS-ASTIP-IVFCAAS),农业部园艺作物生物学与种质创制重点实验室开放课题(IVF2017)
摘    要:为快速、准确地对番茄煤污假尾孢Pseudocercospora fuligena进行检测与定量分析,基于其Avr4基因设计特异性引物JWB-9F/JWB-7R,建立实时荧光定量PCR检测技术,分析该检测技术的特异性和灵敏度,并利用采集自重庆市、河北省和广西壮族自治区的14份材料对该检测技术的应用效果进行验证。结果表明,引物JWB-9F/JWB-7R仅可从番茄煤污假尾孢基因组DNA中扩增出232 bp的目的片段,特异性良好;实时荧光定量PCR检测技术的灵敏度为67.09 copies/μL,是普通PCR检测技术的1 000倍。且该实时荧光定量PCR检测技术可以实现未显症样本中番茄煤污假尾孢的定量检测,检测限为6.02×10~2copies/μL,实际应用效果较好。表明所建立的实时荧光定量PCR检测技术可用于番茄煤污假尾孢叶斑病的早期诊断和预测预报。

关 键 词:煤污假尾孢  Avr4  实时荧光定量PCR  检测
收稿时间:2018/12/25 0:00:00

Establishment and application of real-time quantitative PCR assay for detection of fungal pathogen Pseudocercospora fuligena in tomato
Kang Huajun,Chai Ali,Shi Yanxi,Xie Xuewen,Guo Jianguang and Li Baoju.Establishment and application of real-time quantitative PCR assay for detection of fungal pathogen Pseudocercospora fuligena in tomato[J].Acta Phytophylacica Sinica,2019,46(6):1214-1221.
Authors:Kang Huajun  Chai Ali  Shi Yanxi  Xie Xuewen  Guo Jianguang and Li Baoju
Affiliation:Institute of Vegetables and Flowers, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081, China,Institute of Vegetables and Flowers, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081, China,Institute of Vegetables and Flowers, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081, China,Institute of Vegetables and Flowers, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081, China,Vegetable Development Center of Yanhu District, Yuncheng 044000, Shanxi Province, China and Institute of Vegetables and Flowers, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081, China
Abstract:
Keywords:Pseudocercospora fuligena  Avr4  real-time fluorescent quantitative PCR (qPCR)  detection
本文献已被 CNKI 等数据库收录!
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