抗人FcεRIα单克隆抗体的制备及初步鉴定

目的制备鼠抗人IgE高亲和力受体FceRIa的单克隆抗体并对其进行初步鉴定，为过敏性疾病的相关研究提供条件。方法用人FceRIα重组蛋白作为抗原免疫BALB／C小鼠，常规方法进行融合，经筛选及克隆化建立可稳定分泌抗人FceRIαmAb的杂交瘤细胞株，用ELISA、免疫荧光标记、荧光显微镜和流式细胞仪分析以及Western—Blot方法进行抗体的初步鉴定。结果筛选到2株可稳定分泌抗人FcεRIα单克隆抗体的细胞株，流式细胞术分析此2株抗体与CHO3D10细胞的结合率均大于95％，免疫荧光显示2株抗体均能与FcεRIα发生特异性反应。Western-Blot结果显示抗体轻重链分别约28Kd与50Kd。结论制备的两株FcεRIα的单克隆抗体可特异性与细胞表面FcεRI结合，可用于肥大细胞功能以及变态反应病临床治疗的进一步研究。