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靶向Survivin的小分子干扰RNA对骨肉瘤细胞的体内外抑制作用
引用本文:李鲲,马德彰,勘武生,李鹏,肖军,王威.靶向Survivin的小分子干扰RNA对骨肉瘤细胞的体内外抑制作用[J].中华实验外科杂志,2010,27(10).
作者姓名:李鲲  马德彰  勘武生  李鹏  肖军  王威
作者单位:华中科技大学同济医学院附属普爱医院骨科,武汉,430030
基金项目:武汉市卫生局临床医学科研基金资助项目 
摘    要:目的 观察靶向Survivin基因的小分子干扰RNA(siRNA)表达载体对人骨肉瘤细胞MG-63的体内外抑制作用.方法 体外构建Survivin siRNA表达载体pSilence2.1-neo-Survivin,转染骨肉瘤细胞株MG-63、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫组织化学(SP)法检测转染前后Survivin mRNA及蛋白的表达,流式细胞仪检测细胞周期分布,吖啶橙荧光染色法观察细胞凋亡,建立裸鼠移植瘤模型,记录瘤体形成时间及肿瘤生长.结果 转染后MG-63细胞Survivin基因mRNA水平和蛋白表达显著下降,转染后mRAN表达抑制率为85.08%,增殖指数为空白组的28.20%;细胞周期分析显示:shRNA组G0/G1期细胞明显增多,而G2/M期、S期细胞数目减少;吖啶橙染色显示转染组细胞出现明显核碎裂等凋亡改变,转染组凋亡率为24.54%;稳定转染组细胞裸鼠体内致瘤能力降低,转染组成瘤时间为(13.2±2.0)d,空白组为(6.5±1.6)d,两者比较差异有统计学意义(P<0.01).4周时同空白组相比转染组瘤体体积小62.89%(P<0.01),重量轻59.07%(P<0.01).结论 靶向Survivin基因的siRNA表达载体可以显著抑制骨肉瘤细胞MG-63增殖,促进细胞凋亡;明显抑制人骨肉瘤细胞的致瘤活性及裸鼠移植瘤的生长.

关 键 词:RNA干扰  骨肉瘤  裸鼠  移植瘤

Small-interference RNA targeting Survivin inhibits proliferation of human osteosarcoma cell line MG-63 in vitro and in vivo
LI Kun,MA De-zhang,KAN Wu-sheng,LI Peng,XIAO Jun,WANG Wei.Small-interference RNA targeting Survivin inhibits proliferation of human osteosarcoma cell line MG-63 in vitro and in vivo[J].Chinese Journal of Experimental Surgery,2010,27(10).
Authors:LI Kun  MA De-zhang  KAN Wu-sheng  LI Peng  XIAO Jun  WANG Wei
Abstract:
Keywords:Survivin
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