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重组腺病毒Ad-mALR和Ad-hALR的构建及其对棕榈酸(PA)诱导的L02细胞凋亡的影响
引用本文:杨娇,唐霓,孙航,刘杞,邓健川.重组腺病毒Ad-mALR和Ad-hALR的构建及其对棕榈酸(PA)诱导的L02细胞凋亡的影响[J].解放军医学杂志,2016(7):560-565.
作者姓名:杨娇  唐霓  孙航  刘杞  邓健川
作者单位:1. 400010,重庆 重庆医科大学病毒性肝炎研究所、重庆医科大学附属第二医院教育部感染性疾病分子生物学重点实验室;2. 400010,重庆 重庆医科大学附属第二医院血液内科
基金项目:This work was supported by the Key Projects of Chongqing Municipal Health Bureau (2011-1-051) 重庆市卫生局重点项目(2011-1-051)
摘    要:目的 构建含肝再生增强因子(ALR)基因的重组腺病毒并探讨其抗凋亡功能.方法 采用基因重组法构建重组穿梭载体pAdTrack-TO4-mALR和pAdTrack-TO4-hALR,同源重组法构建重组腺病毒Ad-GFP-mALR和Ad-GFP-hALR,4轮扩增后获得高滴度Ad-GFP-mALR和Ad-GFP-hALR.将上述腺病毒感染L02细胞,通过绿色荧光蛋白(GFP)的表达了解其感染率;Western blotting法检测ALR及Bcl-2/Bax蛋白表达;CCK-8法检测细胞增殖活性;流式细胞仪检测ALR对棕榈酸(PA)诱导的L02细胞凋亡的影响.结果 重组腺病毒Ad-GFP-mALR和Ad-GFP-hALR构建成功,且均能高效感染并稳定表达于L02细胞.与非感染组和感染空载病毒组相比,过表达ALR能促进L02细胞的增殖,并抵抗PA诱导的L02细胞凋亡作用,明显降低Bax,增加Bcl-2蛋白的表达.结论 ALR对寸L02细胞具有促增殖及抗PA诱导的细胞凋亡的作用.

关 键 词:肝再生增强因子  棕榈酸  细胞凋亡

Construction of recombinant adenovirus Ad-mALR and Ad-hALR and its influence on the L02 cell apoptosis induced by palmitic acid
Abstract:
Keywords:augmenter of liver regeneration  palmitic acid  apoptosis
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