| miRNA-33a抑制人结肠癌细胞HCT-116增殖的机制研究 |
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| 引用本文： | 黄重发,付启梅,周怿,朱清,卜全慧.miRNA-33a抑制人结肠癌细胞HCT-116增殖的机制研究[J].解放军医学杂志,2016(9):725-729. |
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| 作者姓名： | 黄重发 付启梅 周怿 朱清 卜全慧 |
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| 作者单位： | 210002南京,解放军第454医院消化科 |
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| 摘 要： | 目的 探讨miRNA-33a抑制人结肠癌细胞HCT-116增殖的机制.方法 化学法合成miRNA-33a mimics、miRNA-33a inhibitor及阴性对照(NC)序列,然后转染至HCT-116细胞.转染后48h,采用Real-time PCR检测细胞中miRNA-33a含量的变化,Western blotting检测细胞中Twist蛋白含量的变化;转染后24、48、72h,采用CCK-8的检测肿瘤细胞增殖活性的变化.采用信息学软件预测miRNA-33a与Twist的结合位点,并通过荧光素酶报告基因法证实预测的结合位点.结果 miRNA-33a mimics及miRNA-33a inhibitor转染后可明显上调或下调HCT-116细胞内miRNA-33a的相对含量(P＜0.05),而NC转染组细胞miRNA-33a含量与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05);miRNA-33a mimics及miRNA-33a inhibitor转染后可明显下调或上调HCT-116细胞内Twist蛋白的表达,与对照组比较差异有统计学意义(p＜0.05),而NC转染组细胞内Twist含量与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05);miRNA-33a mimics及miRNA-33ainhibitor转染后可明显下调或上调HCT-116细胞对数生长期的增殖活性,转染后48h和72h与对照组比较差异均有统计学意义(p＜0.05),而NC转染组细胞增殖活性与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).荧光素酶实验显示,miRNA-33amimics和miRNA-33a inhibitor转染可以抑制或促进野生型报告基因荧光素酶活性(P＜0.05),而对突变型报告基因荧光素酶活性无明显影响(P＞0.05).结论 miRNA-33a可以通过抑制其靶基因Twist的表达抑制HCT-116细胞的增殖活性.
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| 关 键 词： | 微RNAs 结肠肿瘤 细胞增殖 |
Mechanism of inhibitory effect of miRNA-33a on proliferation of HCT-116 cells |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | miRNAs colonic neoplasms cell proliferation |
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