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| 农杆菌介导甜高梁转Bt cry1Ah的研究 | |
| 引用本文： | 朱莉,郎志宏,李桂英,何康来,岳同卿,张杰,黄大昉.农杆菌介导甜高梁转Bt cry1Ah的研究[J].中国农业科学,2011,44(10). |
| 作者姓名： | 朱莉 郎志宏 李桂英 何康来 岳同卿 张杰 黄大昉 |
| 作者单位： | 1. 中国农业科学院生物技术研究所,北京,100081 2. 中国农业科学院作物科学研究所/农作物基因资源与基因改良国家重大科学工程/生物质能源研究中心,北京,100081 3. 中国农业科学院植物保护研究所/植物病虫害生物学国家重点实验室,北京,100193 |
| 基金项目： | 国家"863"计划项目 |
| 摘 要： | 目的]建立一套高效、稳定的甜高梁农杆菌遗传转化体系,并在甜高梁中验证来源于苏云金芽胞杆菌新型杀虫基因cry1Ah表达产物的杀虫活性.方法]以甜高粱幼穗愈伤组织为转化受体,通过农杆菌介导法将密码子优化过的Bt cry1Ah导入2个甜高梁品种"BABUSH"和"MN-3025"中.对获得的再生植株进行 PCR检测、RT-PCR分析及除草剂抗性、目的蛋白表达水平和抗虫性鉴定分析.结果]对336块幼穗愈伤组织块进行了农杆菌侵染,经双丙氨膦(Bialaphos)梯度筛选后共获得66株再生植株,PCR鉴定在8个转化事件中有22株为阳性植株,平均转化率为2.38%.RT-PCR检测结果表明,cry1Ah在T.甜高梁转基因植株中能够正常转录.Western blotting分析和ELISA定量测定显示,有5株可检测到Bt蛋白,但Bt蛋白含量差异较大,最高可达165.69ng·g-1叶片鲜重(FW),最低的仅为1.93 ng·g,-1叶片鲜重(FW),平均为87.50 ng·g-1FW.饲虫试验表明,有2株转基因甜高粱植株对亚洲玉米螟(Ostrinia furnacalis)表现为抗性.结论]利用建立的以甜高粱幼穗为外植体的农杆菌遗传转化体系,可获得具有玉米螟抗性的转基因甜高粱植株,其后代遗传稳定性还有待于进一步的研究. |
| 关 键 词： | 甜高梁 cry1Ah 农杆菌转化 抗虫性 |
Introduction of Bt cry1Ah Gene into Sweet Sorghum(Sorghum bicolor L.Moench)by Agrobacterium tumefaciens-Mediated Tranformation |
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| ZHU Li,LANG Zhi-hong,LI Gui-ying,HE Kang-lai,YUE Tong-qing,ZHANG Jie,HUANG Da-fang.Introduction of Bt cry1Ah Gene into Sweet Sorghum(Sorghum bicolor L.Moench)by Agrobacterium tumefaciens-Mediated Tranformation[J].Scientia Agricultura Sinica,2011,44(10). | |
| Authors: | ZHU Li LANG Zhi-hong LI Gui-ying HE Kang-lai YUE Tong-qing ZHANG Jie HUANG Da-fang |
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