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人羧肽酶A1活性中心基因的克隆及原核表达
引用本文:岳乔红,于文彬,郝晓柯,别良峰,程晓东,苏明权,杨柳.人羧肽酶A1活性中心基因的克隆及原核表达[J].第四军医大学学报,2003,24(23):2132-2135.
作者姓名:岳乔红  于文彬  郝晓柯  别良峰  程晓东  苏明权  杨柳
作者单位:第四军医大学西京医院检验科,陕西,西安,710033
基金项目:国家“十五”重大科技专项课题 (2 0 0 2AA2Z31 0 9),国家“863”资助项目 (2 0 0 1AA2 1 532 ),国家教育部高等学校青年骨干教师资助计划
摘    要:目的:克隆人羧肽酶A1(carboxyrpeptidase A1,CPA1)活性中心基因,构建重组表达载体并对其进行诱导表达。方法:通过RT-PCR方法扩增出正常胰腺组织中CPA1活性中心基因,克隆入载体pGEM-Teasyr,测序分析.将该目的基因亚克隆于表达载体pGEX-4T-1,测序证实序列正确后转化大肠杆菌DH5α,经IPTG诱导表达重组蛋白。结果:获得了人CPA1活性中心基因,构建了重组表达质粒,表达的蛋白以SDS-PAGE分析,在Mr约46000处出现一条新生蛋白带,经凝胶薄层扫描检测,表达量约占菌体总蛋白的22.1%。结论:成功克隆人CPA1活性中心基因并得到了其原核表达产物,为获得分子量小而具有相似活性的蛋白奠定了基础。

关 键 词:羧肽酶A1  活性中心  基因克隆  原核表达
文章编号:1000-2790(2003)23-2132-04
修稿时间:2003年5月30日

Cloning and prokaryotic expression of human carboxypeptidase A1 active center gene
YUE Qiao Hong,YU Wen Bin,HAO Xiao Ke,BIE Liang Feng,CHENG Xiao Dong,SU Ming Quan,YANG Liu.Cloning and prokaryotic expression of human carboxypeptidase A1 active center gene[J].Journal of the Fourth Military Medical University,2003,24(23):2132-2135.
Authors:YUE Qiao Hong  YU Wen Bin  HAO Xiao Ke  BIE Liang Feng  CHENG Xiao Dong  SU Ming Quan  YANG Liu
Affiliation:YUE Qiao Hong,YU Wen Bin,HAO Xiao Ke,BIE Liang Feng,CHENG Xiao Dong,SU Ming Quan,YANG Liu Department of Clinical Laboratoties,Xijing Hospital,Fourth Military Medical University,Xi'an 710033,China
Abstract:
Keywords:carboxypeptidase A1  active center  gene cloning  prokaryotic expression
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