| 传统中药金钱草ISSR-PCR反应体系的正交优化研究 |
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| 引用本文： | 任风鸣,胡开治,刘燕琴,焦雁翔,刘杰,罗敏,全健.传统中药金钱草ISSR-PCR反应体系的正交优化研究[J].中国中药杂志,2014,39(12):2233-2238. |
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| 作者姓名： | 任风鸣 胡开治 刘燕琴 焦雁翔 刘杰 罗敏 全健 |
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| 作者单位： | 重庆市药物种植研究所, 重庆 408435;重庆市药物种植研究所, 重庆 408435;重庆市药物种植研究所, 重庆 408435;重庆市药物种植研究所, 重庆 408435;重庆市药物种植研究所, 重庆 408435;重庆市药物种植研究所, 重庆 408435;重庆市药物种植研究所, 重庆 408435 |
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| 基金项目： | 重庆市道地药材规范化生产工程技术研究中心项目（cstc2012pt-gc0005）；重庆市卫生局中医药科技项目（2010-1-16）；重庆市药物种植研究所创新基金项目（YK201206） |
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| 摘 要： | 建立稳定、可靠的金钱草ISSR-PCR反应体系，为金钱草遗传多样性分析、优良品种选育、药材分子鉴定奠定基础。该研究在7水平单因素实验的基础上，采用L16（45）正交试验设计，应用SPSS 19.0进行方差分析，对影响反应体系的5个主要因素在4个水平上进行优化。利用优化的反应体系，筛选引物最适退火温度，以23份不同产地金钱草材料检测体系稳定性。结果显示模板DNA，引物，dNTP，Mg2+，Taq酶5个因素对金钱草ISSR-PCR反应结果均有极显著影响，影响大小依次为引物>Taq酶>模板DNA>Mg2+>dNTP，确定最优反应体系为总体积25 μL，模板DNA 60 ng，引物0.3 μmol·L-1，dNTP 0.2 mmol·L-1，Mg2+ 1.8 mmol·L-1，Taq酶1.25 U。经不同产地样品检测，该优化体系稳定、可靠。该研究为其他物种ISSR-PCR体系的优化提供参考。
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| 关 键 词： | 金钱草 正交设计 ISSR-PCR 体系优化 |
| 收稿时间： | 2014/3/14 0:00:00 |
Optimization for ISSR-PCR system of traditional Chinese medicine Lysimachia christinae by orthogonal design |
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| REN Feng-ming,HU Kai-zhi,LIU Yan-qin,JIAO Yan-xiang,LIU Jie,LUO Min and QUAN Jian.Optimization for ISSR-PCR system of traditional Chinese medicine Lysimachia christinae by orthogonal design[J].China Journal of Chinese Materia Medica,2014,39(12):2233-2238. |
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| Authors: | REN Feng-ming HU Kai-zhi LIU Yan-qin JIAO Yan-xiang LIU Jie LUO Min and QUAN Jian |
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| Affiliation: | Chongqing Institute of Medicinal Plant Cultivation, Chongqing 408435, China;Chongqing Institute of Medicinal Plant Cultivation, Chongqing 408435, China;Chongqing Institute of Medicinal Plant Cultivation, Chongqing 408435, China;Chongqing Institute of Medicinal Plant Cultivation, Chongqing 408435, China;Chongqing Institute of Medicinal Plant Cultivation, Chongqing 408435, China;Chongqing Institute of Medicinal Plant Cultivation, Chongqing 408435, China;Chongqing Institute of Medicinal Plant Cultivation, Chongqing 408435, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Lysimachia christinae orthogonal design ISSR-PCR system optimization |
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