| 大鼠嗅球嗅鞘细胞的体外分离培养及纯化 |
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| 引用本文： | 郭冕,郑永日,李青松,王建交,孙家行,葛云龙,赵 岩.大鼠嗅球嗅鞘细胞的体外分离培养及纯化[J].中国神经再生研究,2009,13(40):7838-7842. |
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| 作者姓名： | 郭冕 郑永日 李青松 王建交 孙家行 葛云龙 赵 岩 |
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| 作者单位： | 哈尔滨医科大学附属第二医院脑外科,哈尔滨医科大学附属第二医院神经外科,哈尔滨医科大学附属第二医院脑外科,哈尔滨医科大学附属第二医院,哈尔滨医科大学附属第二医院,哈尔滨医科大学附属第二医院,哈尔滨医科大学附属第二医院 |
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| 摘 要： | 背景：差速贴壁+Thy1.1抗体及补体纯化法的应用较多，细胞换液过程中使用含血清的培养基主要针对成纤维细胞的去除，而对神经元的去除作用不明显。
目的：根据神经元体外培养需要血清的特性，拟利用无血清培养基在体外建立一种分离培养嗅鞘细胞的简单方法。
设计、时间及地点：细胞学体外观察，于2008-06/2009-01在哈尔滨医科大学动物实验中心完成。
材料：成年SD大鼠10只，由哈尔滨医科大学实验动物中心提供。
方法：在差速贴壁+Thy1.1抗体及补体纯化法的基础上，剪开大鼠颅骨，显露位于颅腔前方的嗅球，取出2只嗅球，在显微镜下去除嗅球表面的软脑膜和毛细血管及外周组织，保留富含嗅鞘细胞的嗅神经层和嗅球颗粒层，剪成1 mm3小块分离获取单细胞悬浮液，调整细胞密度至1×107 L-1，接种在用poly-l-lysine包被的培养瓶或培养板中，于37 ℃、体积分数为5%的CO2培养箱中培养，第3天用无血清DMEM/F12培养基换液培养。
主要观察指标：嗅鞘细胞的形态学观察、生长曲线分析、免疫荧光染色结果。
结果：培养前3 d细胞数目无明显增加，甚至减少；然后细胞数目逐渐增多，13 d细胞基本长满；传10代后细胞形态发生明显变化，胞浆内出现许多空泡，细胞增殖速度减慢或停止。纯化培养10 d后，培养板内双极和三极细胞均呈GFAP，NGFR p75阳性。
结论：在差速贴壁+Thy1.1抗体及补体纯化法的基础上，利用无血清DMEM/F12培养基进行换液培养可使嗅鞘细胞迅速增殖，是一种效率较高的体外培养方法。
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| 关 键 词： | 嗅鞘细胞 分离 培养 纯化 |
| 收稿时间： | 7/8/2009 12:00:00 AM |
| 修稿时间： | 7/8/2009 12:00:00 AM |
In vitro isolation, culture, and purification of olfactory ensheathing cells from olfactory bulb of rats |
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| Affiliation: | Department of Neurosurgery, Second Hospital Affiliated to Harbin Medical University, Harbin 150086, Heilongjiang Province, China,Department of Neurosurgery, Second Hospital Affiliated to Harbin Medical University, Harbin 150086, Heilongjiang Province, China,Department of Neurosurgery, Second Hospital Affiliated to Harbin Medical University, Harbin 150086, Heilongjiang Province, China,Department of Neurosurgery, Second Hospital Affiliated to Harbin Medical University, Harbin 150086, Heilongjiang Province, China,Department of Neurosurgery, Second Hospital Affiliated to Harbin Medical University, Harbin 150086, Heilongjiang Province, China,Department of Neurosurgery, Second Hospital Affiliated to Harbin Medical University, Harbin 150086, Heilongjiang Province, China,Department of Neurosurgery, Second Hospital Affiliated to Harbin Medical University, Harbin 150086, Heilongjiang Province, China |
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