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| 人骨形态发生蛋白-7在人骨肉瘤细胞U2-OS中的表达 | |
| 作者单位： | ;1.济南大学山东省医学科学院医学与生命科学学院;2.山东省医药生物技术研究中心卫生部生物技术药物重点实验室山东省罕少见病重点实验室 |
| 摘 要： | 目的探讨人骨肉瘤细胞U2-OS表达重组人骨形态发生蛋白-7(recombinant human bone morphogenetic protein-7,rhBMP-7)的可行性。方法将hBMP-7成熟肽基因片段克隆至载体pcDNA3.1上,构建真核表达质粒pcDNA3.1-rhBMP-7。利用Lipofectamine 2000将重组质粒转染至U2-OS细胞中,采用实时荧光定量PCR及Western blot法检测细胞中hBMP-7基因mRNA和rhBMP-7的表达。结果真核组表达质粒pcDNA3.1-rhBMP-7经NdeⅠ和EcoRⅤ双酶切及测序鉴定证明构建正确。pcDNA3.1-rhBMP-7质粒转染的U2-OS细胞中hBMP-7基因mRNA和rhBMP-7的表达水平均明显高于pcDNA3.1载体转染的细胞(P0.05)。结论成功构建了hBMP-7基因的重组表达质粒,并在U2-OS细胞中成功表达,为进一步研究hBMP-7的制备方法和建立新的表达系统奠定了基础。 |
| 关 键 词： | 人骨形态发生蛋白-7 U2-OS细胞 基因重组 基因表达 |
Expression of human bone morphogenetic protein-7 in human osteosarcoma U2-OS cells |
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