| 人脂蛋白脂酶基因重组质粒的构建及其表达 |
| |
| 引用本文： | 胡耀敏,刘伟.人脂蛋白脂酶基因重组质粒的构建及其表达[J].上海交通大学学报(医学版),2006,26(9). |
| |
| 作者姓名： | 胡耀敏 刘伟 |
| |
| 作者单位： | 上海交通大学医学院仁济医院内分泌代谢病科,上海,200127 |
| |
| 摘 要： | 目的 研究野生型人脂蛋白脂酶(LPL)cDNA重组表达质粒的构建了及其在COS-1细胞中的表达.方法 采用RT-PCR法从人大网膜脂肪组织获取LPL cDNA基因,以pcDNA3.1Zeo(+)质粒作为载体,运用基因克隆技术构建野生型人LPLcDNA重组质粒,限制性内切酶酶切、PCR以及双向测序鉴定重组质粒;运用Lipofectamine 2000TM将重组pcDNA3.1Zeo(+)-LPLcDNA质粒导入COS-1细胞,RT-PCR法检测LPL mRNA,ELISA法和比色法分别检测细胞裂解液及细胞培养基中LPL浓度及活性.结果 经限制性内切酶酶切及PCR鉴定,证实LPL基因已被连接到pcDNA3.1Zeo(+)质粒中;DNA双向测序证实其产物与基因库中LPL基因序列完全一致.LPL mRNA和蛋白表达及其活性测定结果表明,pcDNA3.1Zeo(+)-LPL cDNA重组质粒已转染入COS-1细胞中.结论 实验成功构建野生型人LPL cDNA重组表达质粒,并证实其能在COS-1细胞中有效表达.
|
| 关 键 词： | 脂蛋白脂酶 重组质粒 COS-1细胞 体外表达 |
Construction and Expression of Recombinant Wild Lipoprotein Lipase Gene Plasmid |
| |
| HU Yao-min,LIU Wei.Construction and Expression of Recombinant Wild Lipoprotein Lipase Gene Plasmid[J].Journal of Shanghai Jiaotong University:Medical Science,2006,26(9). |
| |
| Authors: | HU Yao-min LIU Wei |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | |
| 本文献已被 万方数据 等数据库收录！ |
|
