人生长激素基因在昆虫细胞中的表达(英文)

近年发展起来的昆虫细胞－杆状病毒基因工程系统具有良好的优越性：（１）表达产量高，（２）产物的免疫原性、功能性类似于天然产物，（３）适用于悬浮及无血清培养。本实验中，将外源基因ｈＧＨ克隆至质粒ｐＶＬ１３９３，形成转移载体ｐＶＬ１３９３／ｈＧＨ（Ｆｉｇ．１＆２）。与昆虫核多角体病毒ＡｃＮＰＶ基因组ＤＮＡ共转染秋粘虫细胞Ｓｆ９（Ｆｉｇ．３），ｐＶＬ１３９３／ｈＧＨ与ＡｃＮＰＶ基因组ＤＮＡ发生同源重组，取代多角体蛋白基因。经空斑分析纯化得到不含多角体，单一表达的重组病毒ｒＡｃＶｈＧＨ（Ｆｉｇ．４），感染滴度达到２．０３ｘ１０８ＰＵＦ／ｍＬ。经反复实验，１０５细胞／ｍＬ感染６～７天后收获培养上清液，可得到表达量为４０μｇ／ｍＬ的ｈＧＨ蛋白（Ｆｉｇ．５，６＆７）。