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| bcr／abl特异性siRNA真核表达载体的构建及鉴定 | |
| 引用本文： | 周永安,张景萍,郭向荣.bcr／abl特异性siRNA真核表达载体的构建及鉴定[J].临床医药实践,2009,18(9):650-652. |
| 作者姓名： | 周永安 张景萍 郭向荣 |
| 作者单位： | 1. 山西省儿童医院,山西,太原,030013 2. 太原市中心医院,山西,太原,030009 3. 山西煤炭中心医院,山西,太原030006 |
| 基金项目： | 山西省自然科学基金资助项目 |
| 摘 要： | 目的:构建ber/abl的特异性siRNA真核细胞表达载体,并初步探索对K562细胞bcr/abl mRNA和P210蛋白的影响.方法:根据GenBank数据库提供的bcr/abl基因核苷酸序列,按照Tusch Ⅰ设计原则,选择设计双链小干扰RNA(siRNA),再转化为能表达其小发卡结构RNA(shRNA)的DNA序列,并与pTER质粒定向连接,构建受控于人RNA聚合酶Ⅲ启动子H1的真核表达载体pTER117,经限制性内切酶酶切和DNA测序进行鉴定;在脂质体的介导下转染K562细胞,用RT-PCR分析bcr/abl mRNA的表达,细胞化学染色检测P210蛋白的表达.结果:构建bcr/abl融合基因siRNA真核表达载体pTER117经限制性内切酶酶切和DNA测序证实与设计完全一致,转染K562细胞24 h后,pTER117使bcr/abl mRNA的相对水平下降50%,使P210蛋白下降47%.结论:bcr/abl融合基因siR-NA真核细胞表达载体构建成功,并有效干扰K562细胞bcr/abl的表达. |
| 关 键 词： | 慢性髓细胞性白血病 bcr/abl融合基因 真核表达载体 RNA干扰 |
Construction of eukaryotic expression vector of siRNA specific to bcr/abl fusion gene |
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| ZHOU Yon-gan,ZHANG Jing-ping,GUO Xiang-rong.Construction of eukaryotic expression vector of siRNA specific to bcr/abl fusion gene[J].Proceeding of Clinical Medicine,2009,18(9):650-652. | |
| Authors: | ZHOU Yon-gan ZHANG Jing-ping GUO Xiang-rong |
| Abstract: | |
| Keywords: | |
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