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乙型肝炎表面抗原基因启动子ⅠDNA结合蛋白1对诱导型一氧化氮合酶基因启动子转录活性的双向调节
引用本文:郭风劲,成军,纪冬,刘妍,王琳,张黎颖,宋方洲.乙型肝炎表面抗原基因启动子ⅠDNA结合蛋白1对诱导型一氧化氮合酶基因启动子转录活性的双向调节[J].中华传染病杂志,2007,25(5):257-262.
作者姓名:郭风劲  成军  纪冬  刘妍  王琳  张黎颖  宋方洲
作者单位:1. 重庆医科大学分子生物学教研室,400016
2. 100011,北京地坛医院传染病研究所
3. 重庆医科大学分子生物学教研室
基金项目:国家自然科学基金资助项目(30371288);北京市自然科学基金资助项目(5042024);第35批博士后科学基金资助项目(2004035045)
摘    要:目的探讨HBV表面抗原基因启动子ⅠDNA结合蛋白1(SBP1)对诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因启动子转录的凋节作用。方法利用生物信息学技术确定iNOS基因的启动子区域(iNOSp)和3个缺失突变体的基因序列,PCR分别扩增iNOSp和3个缺失体的基因序列,分别克隆至报告基因表达载体pCAT3-Basic中,构建pCAT3-iNOSp报告载体;以构建的这4种报告质粒分别转染人肝母细胞瘤细胞系HepG2,用ELISA检测氯霉素乙酰转移酶(CAT)的表达活性;并与构建的真核表达载体pcDNA3.1(-)-HBVSBP1共转染HepG2细胞系,用ELISA检测CAT的表达活性。结果成功获得iNOS基因启动子和3个缺失突变体的正确克隆,其中pl—iNOSp和pcDNA3.1(-)-HBVSBP1瞬时共转染HepG2细胞时,iNOS启动子的转录活性上升1.54倍;p3-iNOSp启动子和pcDNA3.1(-)-HBVSBP1瞬时共转染HepG2细胞时,iNOS启动子的转录活性下降31.3%,重复实验得到相似结果。结论克隆的新基因SBP1在细胞内的表达,对iNOS基因反式激活iNOS启动子的转录活性具有明显的双向凋节作用,双向调节的部位是iNOS启动子的核因子(NF)-IL6、A-激活域结合位点(AABS)和NF-κB这3个结合位点。

关 键 词:肝炎病毒  乙型  启动区(遗传学)  一氧化氮合酶  白细胞介素6  结合部位
修稿时间:2006-05-18

The study of bidirectional regulation effect on inducible nitric oxide synthase gene promoter by hepatitis B virus preS1 promoter DNA-binding protein 1
GUO Feng-jin,CHENG Jun,JI Dong,LIU Yan,WANG Lin,ZHANG Li-yin,SONG Fang-zhou.The study of bidirectional regulation effect on inducible nitric oxide synthase gene promoter by hepatitis B virus preS1 promoter DNA-binding protein 1[J].Chinese Journal of Infectious Diseases,2007,25(5):257-262.
Authors:GUO Feng-jin  CHENG Jun  JI Dong  LIU Yan  WANG Lin  ZHANG Li-yin  SONG Fang-zhou
Affiliation:Institute of Infectious Diseases, Ditan Hospital, Beijing 100011 , China
Abstract:
Keywords:
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