| 逆转录病毒载体介导HSV1-tk/GCV肿瘤自杀基因治疗系统的构建 |
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| 引用本文： | 杜标炎,谭宇蕙,吴映雅,赵鹏,周联,赵亚刚.逆转录病毒载体介导HSV1-tk/GCV肿瘤自杀基因治疗系统的构建[J].广州中医药大学学报,2004,21(5):395-398. |
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| 作者姓名： | 杜标炎 谭宇蕙 吴映雅 赵鹏 周联 赵亚刚 |
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| 作者单位： | 广州中医药大学病理教研室,广州,510405;广州中医药大学生化教研室,广州,510405;广州中医药大学免疫教研室,广州,510405;广州军区广州总医院消化科,广州,510010 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(编号:30171201)，广东省中医药管理局资助项目(编号:A401028)，广州市科技计划项目(编号:2002J1-C7041) |
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| 摘 要： | 【目的】 探讨自杀基因抗肿瘤系统构建的方法。【方法】 用DNA重组技术将单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV1-tk)定向克隆入逆转录病毒载体pLXSN,并用限制性内切酶进行酶切及测序鉴定;用PolyFect Transfection试剂介导重组逆转录病毒转染入包装细胞系PT67,通过G418筛选建立稳定产病毒的细胞株,将病毒感染人胃癌细胞,检测HSV1-tk自杀基因治疗系统在体外的抗肿瘤效应。【结果】 经酶切鉴定和DNA序列测定,证明HSV1-tk基因成功定向插入到pLXSN载体中;重组病毒DNA转染包装细胞,筛选出对G418具稳定抗性的克隆PT67/tk,扩大培养,获取病毒滴度为4×10~4 cfu/mL的重组逆转录病毒培养液;感染胃癌细胞SGC-7901后再筛选出G418抗性克隆株SGC-7901/tk。丙氧鸟苷(GCV)对SGC-7901/tk有明显杀伤作用,对SGC-7901无明显毒性,证明该病毒表达HSV1-tk基因,表达产物具有生物活性。【结论】 将HSV1-tk定向克隆入逆转录病毒载体的方法可成功获取表达HSV1-tk(基因的逆转录病毒,成功建立了肿瘤自杀基因治疗系统,这将为进一步研究中医药对自杀基因抗肿瘤的增效作用奠定基础。
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| 关 键 词： | 自杀基因 DNA 重组 基因 肿瘤抑制 基因疗法 |
| 文章编号： | 1007-3213(2004)05-0395-04 |
| 修稿时间： | 2003年12月9日 |
Retroviral Vector Introduced in the Construction of HSV1-tk/GCV Antitumor Suicide gene Therapeutic System |
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| DU Biaoyan,TAN Yuhui,WU Yingya,ZHAO Peng,ZHOU Lian,ZHAO Yagang.Retroviral Vector Introduced in the Construction of HSV1-tk/GCV Antitumor Suicide gene Therapeutic System[J].Journal of Guangzhou University of Traditional Chinese Medicine,2004,21(5):395-398. |
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| Authors: | DU Biaoyan TAN Yuhui WU Yingya ZHAO Peng ZHOU Lian ZHAO Yagang |
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| Affiliation: | DU Biaoyan~1,TAN Yuhui~2,WU Yingya~2,ZHAO Peng~1,ZHOU Lian~3,ZHAO Yagang~4 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | SUICIDE GENE DNA RECONSTRUCTION GENES TUMOR SUPPRESSOR GENE THERAPY |
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