| 真核表达纯化的SARS-CoV-2 N蛋白在不同人群血清检测中的应用性能分析 |
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| 引用本文： | 杨燕,王慧娟,黄梦婧,黄保英,赵莉,邓瑶,沈晓玲,谭文杰.真核表达纯化的SARS-CoV-2 N蛋白在不同人群血清检测中的应用性能分析[J].病毒学报,2023(2):313-321. |
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| 作者姓名： | 杨燕 王慧娟 黄梦婧 黄保英 赵莉 邓瑶 沈晓玲 谭文杰 |
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| 作者单位： | 1. 温州医科大学检验医学院生命科学学院;2. 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所国家卫生健康委员会生物安全重点实验室;3. 内蒙古医科大学基础医学院微生物教研室 |
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| 摘 要： | 通过真核系统表达纯化新型冠状病毒（SARS-CoV-2）的全长核衣壳蛋白（Nucleocapsid protein,N蛋白），分析其抗原性与应用性能。将SARS-CoV-2 N蛋白表达质粒转染HEK-293T细胞后，通过Western Blot和免疫荧光验证蛋白表达以及表达定位。对N蛋白进行纯化后，通过Western Blot和ELISA并采用多种血清样本（WHO参比品血清、正常人血清、新冠灭活疫苗接种后血清、新冠感染者恢复期血清）对该N蛋白在血清抗体检测中的应用性能进行分析。比较真核系统与原核系统表达的N蛋白抗原性上的差异，并分析基于真核系统表达N蛋白构建的IgG抗体ELISA检测体系与获批的商品化新冠RBD (Receptor binding domain)IgG抗体ELISA检测试剂盒及用于检测中和抗体的活病毒微量中和试验结果间的相关性。结果显示，真核系统表达的全长N蛋白主要定位于胞质，作为抗原检测新冠IgG抗体，具有比原核系统表达的N蛋白更高的检测灵敏度。针对新冠感染者恢复期血清，基于哺乳动物细胞表达的N蛋白构建的ELISA体系检测的IgG抗体滴度与试剂盒检测的RBD-IgG抗...
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| 关 键 词： | 新型冠状病毒 核衣壳蛋白 真核表达 抗原性 ELISA |
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