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大肠杆菌转运蛋白SstT和RhtC的改造对L-苏氨酸产量的影响
引用本文:梁媛,杨书尧,刘宏亮,郝小明,林海龙,谢希贤,陈宁.大肠杆菌转运蛋白SstT和RhtC的改造对L-苏氨酸产量的影响[J].现代食品科技,2014,30(4):99-103.
作者姓名:梁媛  杨书尧  刘宏亮  郝小明  林海龙  谢希贤  陈宁
作者单位:天津科技大学生物工程学院,天津市氨基酸高效绿色制造工程实验室,代谢控制发酵技术国家地方联合工程实验室,天津 300457;天津科技大学生物工程学院,天津市氨基酸高效绿色制造工程实验室,代谢控制发酵技术国家地方联合工程实验室,天津 300457;天津科技大学生物工程学院,天津市氨基酸高效绿色制造工程实验室,代谢控制发酵技术国家地方联合工程实验室,天津 300457;中粮营养健康研究院有限公司,北京 100020;中粮营养健康研究院有限公司,北京 100020;天津科技大学生物工程学院,天津市氨基酸高效绿色制造工程实验室,代谢控制发酵技术国家地方联合工程实验室,天津 300457;天津科技大学生物工程学院,天津市氨基酸高效绿色制造工程实验室,代谢控制发酵技术国家地方联合工程实验室,天津 300457
基金项目:国家高技术研究发展计划(2012AA022102、2012AA02A703);国家重点基础研究发展计划(2013CB733901)
摘    要:L-苏氨酸是一种必需氨基酸,广泛应用于食品、医药和饲料等领域。有报道表明降低胞内L-苏氨酸浓度,解除其对合成途径酶的反馈作用,有利于提高L-苏氨酸产量,因此,本实验利用Red重组技术和基因过表达技术,以L-苏氨酸生产菌Escherichia coli TRFC为出发菌株,成功构建了TRFCΔsstT和TRFCΔsstT+pSTV28-rhtC。摇瓶发酵结果显示,与原菌相比,TRFCΔsstT的L-苏氨酸产量较原菌提高了4.00%,TRFCΔsstT+pSTV28-rhtC的L-苏氨酸产量较TRFCΔsstT+pSTV28提高了18.16%。此外,经检测发现重组菌株胞内L-苏氨酸浓度均低于原菌。最后进行了TRFCΔsstT+pSTV28-rhtC的5 L分批补料发酵实验,其L-苏氨酸产量及糖酸转化率分别较原菌提高了15.33%和16.14%。综上所述,通过改造L-苏氨酸转运系统的SstT和RhtC蛋白,能有效地增强细胞内L-苏氨酸外排能力,降低细胞内L-苏氨酸的浓度,进而有利于L-苏氨酸产量的提高。

关 键 词:大肠杆菌  L-苏氨酸  吸收转运蛋白  输出转运蛋白
收稿时间:2013/11/22 0:00:00

Effect of Transport Proteins SstT and RhtC Modification on L-threonine Production in Escherichia coli
LIANG Yuan,YANG Shu-yao,LIU Hong-liang,HAO Xiao-ming,LIN Hai-long,XIE Xi-xian and CHEN Ning.Effect of Transport Proteins SstT and RhtC Modification on L-threonine Production in Escherichia coli[J].Modern Food Science & Technology,2014,30(4):99-103.
Authors:LIANG Yuan  YANG Shu-yao  LIU Hong-liang  HAO Xiao-ming  LIN Hai-long  XIE Xi-xian and CHEN Ning
Affiliation:College of Biotechnology of Tianjin University of Science and Technology, Tianjin Engineering Lab of Efficient and Green Amino Acid Manufacture, National and Local United Engineering Lab of Metabolic Control Fermentation Technology, Tianjin 300457, China;College of Biotechnology of Tianjin University of Science and Technology, Tianjin Engineering Lab of Efficient and Green Amino Acid Manufacture, National and Local United Engineering Lab of Metabolic Control Fermentation Technology, Tianjin 300457, China;College of Biotechnology of Tianjin University of Science and Technology, Tianjin Engineering Lab of Efficient and Green Amino Acid Manufacture, National and Local United Engineering Lab of Metabolic Control Fermentation Technology, Tianjin 300457, China;COFCO Nutrition and Health Research Institute Co., Ltd., Beijing 100020, China;COFCO Nutrition and Health Research Institute Co., Ltd., Beijing 100020, China;College of Biotechnology of Tianjin University of Science and Technology, Tianjin Engineering Lab of Efficient and Green Amino Acid Manufacture, National and Local United Engineering Lab of Metabolic Control Fermentation Technology, Tianjin 300457, China;College of Biotechnology of Tianjin University of Science and Technology, Tianjin Engineering Lab of Efficient and Green Amino Acid Manufacture, National and Local United Engineering Lab of Metabolic Control Fermentation Technology, Tianjin 300457, China
Abstract:
Keywords:Escherichia coli  L-threonine  uptake carrier  export carrier
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