| 无POU域八聚体结合蛋白基因的克隆及其在Hepa1-6细胞内的表达 |
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| 引用本文： | 张秀娟,王娟,邓鹏,姜勇.无POU域八聚体结合蛋白基因的克隆及其在Hepa1-6细胞内的表达[J].中国航天工业医药,2010(7). |
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| 作者姓名： | 张秀娟 王娟 邓鹏 姜勇 |
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| 作者单位： | 广东医学院生理学教研室 南方医科大学广东省功能蛋白质组学重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金面上项目(NO.30670828) |
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| 摘 要： | 目的构建小鼠无POU域八聚体结合蛋白(non-POU-domain-containing,octamer binding protein,NonO)真核表达载体并在小鼠Hepa 1-6肝癌细胞内表达,观察NonO胞内表达、定位及脂多糖(LPS)对其定位的影响。方法提取小鼠肝组织总RNA,RT-PCR扩增小鼠NonO基因的蛋白编码序列。采用基因重组技术将其亚克隆至pcDNA3-HA真核表达载体中,将该载体瞬时转染Hepa1-6细胞,通过细胞免疫荧光方法观察NonO的胞内表达及LPS对其定位的影响。结果酶切和DNA测序证明所构建质粒正确;细胞免疫荧光可见NonO在Hepa 1-6细胞内表达、分布于细胞核,LPS刺激后NonO分布无明显变化。结论成功构建NonO真核表达载体,为研究NonO在基因表达调控中作用及其生物功能提供了重要载体。进一步证实NonO为定位于细胞核的核蛋白。
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| 关 键 词： | 无POU域八聚体结合蛋白 蛋白表达 蛋白定位 |
Cloning of NonO gene and its expression in Hepa 1-6 cells |
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| Affiliation: | Zhang Xiujuan; Wang Juan; Deng Peng; et al. Department of Physiology; Guangdong Medical College; Zhanjiang 524023; |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Non-POU-domain-containing Protein expression Protein location |
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