| 表达白细胞介素18的条件增殖腺病毒的构建 |
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| 引用本文： | 李望,郑骏年,毛立军,郝林,郑宏祥,刘俊杰,裴冬生,印晓星.表达白细胞介素18的条件增殖腺病毒的构建[J].中华实验外科杂志,2008,25(2). |
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| 作者姓名： | 李望 郑骏年 毛立军 郝林 郑宏祥 刘俊杰 裴冬生 印晓星 |
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| 作者单位： | 1. 徐州医学院附属医院泌尿外科,江苏,221002
2. 徐州医学院肿瘤防治重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，卫生部科研项目 |
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| 摘 要： | 目的 构建表达白细胞介素(IL)-18的条件增殖腺病毒.方法 以质粒pJW-IL18为模板,聚合酶链反应(PCR)扩增获得全长IL-18基因并改变其包含的酶切位点Bgl Ⅱ.将IL-18克隆至pCA13质粒,构建重组质粒pCA13-IL18.用Bgl Ⅱ从pCA13-IL18酶切出包含CMV启动子的IL-18表达框,并克隆进条件增殖腺病毒质粒pZD55,构建重组质粒pZD55-IL18.将pZD55-IL18与含有腺病毒右臂的质粒pBHGE3共转染293细胞,9～12 d后出现病毒空斑.提取重组腺病毒的DNA,PCR鉴定正确者即为条件增殖腺病毒ZD55-IL18.大量扩增,氯化铯梯度离心纯化,测病毒滴度.结果 成功构建了表达IL-18的条件增殖腺病毒.结论 成功构建的ZD55-IL18为肿瘤靶向治疗奠定基础.
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| 关 键 词： | 腺病毒 白介素IL-18 克隆 |
Construction and identification of conditionally replicative adenovirus expressing IL-18 gene |
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