鼠抗肿瘤坏死因子-α单克隆抗体的制备及鉴定 |
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引用本文: | 李萍,蒋琳,马亚茹,鱼轲,郭敏,陆俭.鼠抗肿瘤坏死因子-α单克隆抗体的制备及鉴定[J].粉末涂料与涂装,2008,21(12):1090-1093. |
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作者姓名: | 李萍 蒋琳 马亚茹 鱼轲 郭敏 陆俭 |
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作者单位: | 兰州生物制品研究所第四研究室 |
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摘 要: | 目的制备高中和活性的鼠抗肿瘤坏死因子-α(TNF-α)单克隆抗体,并进行鉴定。方法用重组TNF-α免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗TNF-α单抗,纯化后,用间接ELISA法和微量细胞病变MTT法检测抗体效价,ELISA相加试验测定抗原表位,硫氰酸铵洗脱法测定单抗的相对亲和力指数,并进行类及亚类、细胞染色体核型、特异性及稳定性检测。结果筛选出7株分泌抗TNF单克隆抗体的细胞株,其中6株具有较高的中和活性和良好的稳定性,其细胞上清及腹水的中和效价分别为1∶40~1∶160和(1~3)×10-4,7株单抗均为IgG类IgG1亚类,轻链类型均为κ,细胞核型分析符合杂交瘤细胞特征,特异性良好,5H10株与其余6株有不同的抗原表位,相对亲和力指数为0.4~1.5mol/L。结论已成功制备具有高中和活性的鼠抗TNF-α单克隆抗体,为抗人TNF-α嵌合抗体的构建奠定了基础。
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关 键 词: | 肿瘤坏死因子-α 单克隆抗体 中和活性 |
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