| RT-PCR及RFLP分析技术对鸡传染性支气管炎病毒的诊断和S1基因分型的研究 |
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| 引用本文： | 磨美兰,李康然,韦平.RT-PCR及RFLP分析技术对鸡传染性支气管炎病毒的诊断和S1基因分型的研究[J].中国预防兽医学报,2001,23(4). |
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| 作者姓名： | 磨美兰 李康然 韦平 |
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| 作者单位： | 广西大学动物科技学院,南宁,530005 |
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| 基金项目： | 广西区教育厅科学基金资助项目 |
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| 摘 要： | 本研究使用分别扩增整个S1糖蛋白基因 (引物A)和S1糖蛋白基因N_端高变区Ⅰ (引物B)的 2对引物对 3个IBV标准株M41、Connecticut、Arkansas及 5个地方分离株 (C60 ,D41A ,D41B ,A112 1,A1171)进行RT_PCR扩增。用引物A时 ,有 5个IBV毒株扩增到目的片段 (172 0bp) ;用引物B时 ,所有 8个IBV毒株均得到与预计大小相符的目的产物 (2 2 8bp)。对 172 0bp的PCR产物用限制性内切酶HaeⅢ进行酶切 ,结果得出 3个不同的RFLP图谱 ,其中M41、Connecticut、D41B具有相同的HaeⅢ酶切图谱。Arkansas和D41A则分别具有互不相同的图谱 ;对 2 2 8bp的PCR产物进行DdeⅠ、RsaⅠ限制性内切酶消化 ,根据它们的RFLP图谱 ,8个IBV毒株可分为 5个基因型。综合 2对引物的PCR产物的RFLP分析结果 ,8个IBV毒株可分为 7个基因型 ,分型的结果与传统的血清学方法吻合。本研究建立的方法和技术具有快速、简单、特异、灵敏等优点 ,为现场流行毒株的定型(基因型 /血清型 )及其S1基因变异的跟踪研究以及更有效防制传染性支气管炎奠定了基础。
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| 关 键 词： | 鸡传染性支气管炎病毒 S1基因 反转录酶多聚酶链反应 限制性片段多态性分析 |
Diagnosis of IBV and Typing of the S1 Glycoprotein Gene by Using RT-PCR and RFLP Analysis |
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| MO Meilan,LI Kangran,WEI Ping.Diagnosis of IBV and Typing of the S1 Glycoprotein Gene by Using RT-PCR and RFLP Analysis[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2001,23(4). |
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| Authors: | MO Meilan LI Kangran WEI Ping |
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