| 锌指蛋白ZBTB20基因重组腺病毒表达载体的构建和鉴定* |
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| 引用本文： | 朱晓彤,杨 瑞,周露婷,张晔,李玲,章卫平,施广霞,陈玉霞.锌指蛋白ZBTB20基因重组腺病毒表达载体的构建和鉴定*[J].中国病理生理杂志,2014,30(5):876-880. |
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| 作者姓名： | 朱晓彤 杨 瑞 周露婷 张晔 李玲 章卫平 施广霞 陈玉霞 |
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| 作者单位： | 1第二军医大学基础部病理生理学教研室, 上海 200433; 2大连医科大学病理生理学教研室,辽宁 大连 116044 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目（No.81130084; No.31025013） |
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| 摘 要： | 目的：构建含锌指蛋白ZBTB20基因的重组腺病毒载体,以研究锌指蛋白ZBTB20的生物学功能。方法：将带有FLAG标签的ZBTB20 cDNA片段（ZBTB20-FLAG）克隆至pAdTrack-CMV载体,将该载体与pAdEasy质粒进行细菌内同源重组从而获得重组腺病毒载体pAd-ZBTB20,之后在293细胞中进行包装以及扩增,并对病毒滴度进行检测;采用肝脏组织特异性ZBTB20基因敲除小鼠的原代肝细胞和肝脏组织模型,分别于离体和在体水平鉴定所制备的重组腺病毒Ad-ZBTB20介导的ZBTB20 蛋白表达情况;并采用报告基因技术检测过表达的ZBTB20蛋白的功能活性。结果：成功制备了锌指蛋白ZBTB20重组腺病毒,该重组腺病毒感染原代肝细胞和小鼠肝脏组织能过表达ZBTB20蛋白,并且此ZBTB20蛋白能抑制其下游靶基因甲胎蛋白的转录。结论：所构建的ZBTB20重组腺病毒可以介导ZBTB20的过表达并具备转录调节活性,为今后研究ZBTB20的相关生物学功能奠定了基础。
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| 关 键 词： | 含锌指和BTB区蛋白20 重组腺病毒 甲胎蛋白类 转录调节 |
| 收稿时间： | 2013-11-06 |
Construction and characterization of recombinant adenovirus expression vector containing zinc finger protein ZBTB20 gene |
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| ZHU Xiao-tong,YANG Rui,ZHOU Lu-ting,ZHANG Ye,LI Ling,ZHANG Wei-ping,SHI Guang-xia,CHEN Yu-xia.Construction and characterization of recombinant adenovirus expression vector containing zinc finger protein ZBTB20 gene[J].Chinese Journal of Pathophysiology,2014,30(5):876-880. |
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| Authors: | ZHU Xiao-tong YANG Rui ZHOU Lu-ting ZHANG Ye LI Ling ZHANG Wei-ping SHI Guang-xia CHEN Yu-xia |
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| Affiliation: | 1Department of Pathophysiology, School of Basic Medicine, Second Military Medical University, Shanghai 200433, China; 2Department of Pathophysiology, Dalian Medical University, Dalian 116044, China. |
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| Abstract: | |
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