miR-6216对缺氧/复氧H9C2心肌细胞损伤的影响

目的 探讨miR-6216对缺氧/复氧（H/R）诱导的心肌细胞损伤的影响。方法 体外培养大鼠胚胎心肌细胞H9C2，构建H/R（2 h/4 h）模型。实时荧光定量PCR（qRT PCR）检测miR 6216的表达水平；细胞计数试剂盒（CCK 8）检测细胞存活；平板形成实验检测细胞克隆形成能力；试剂盒检测细胞内丙二醛（MDA）含量和细胞培养液中乳酸脱氢酶（LDH）的活性；流式细胞术检测细胞凋亡；蛋白质印记（Western blot）检测细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）、P21、B细胞淋巴瘤/白血病 2（Bcl 2）、Bcl 2相关X蛋白（Bax）的表达水平。将miR 6216抑制物（anti miR 6216）、miR 6216模拟物（miR 6216 mimics）分别转染H9C2，将缺氧/复氧处理后，采用上述方法检测以上指标变化。结果 缺氧/复氧诱导后H9C2细胞miR 6216的表达水平显著升高，细胞存活率和克隆能力显著降低，MDA含量和LDH活性显著升高，Cyclin D1和Bcl 2的表达显著降低，P21和Bax的表达水平显著升高，细胞凋亡率显著升高（P＜0.05）。抑制miR 6216可显著提高H9C2细胞存活率和克隆形成能力，降低MDA含量和LDH活性，促进Cyclin D1和Bcl 2的表达，抑制P21和Bax的表达，抑制缺氧复氧诱导的细胞凋亡（P ＜0.05）。过表达miR 6216可显著抑制细胞存活和克隆形成能力，升高MDA含量和LDH活性，抑制Cyclin D1和Bcl 2的表达，促进P21和Bax的表达，加剧缺氧复氧诱导的细胞凋亡（P ＜0.05）。结论 miR-6216在缺氧/复氧诱导的心肌细胞中表达上调，抑制miR 6216表达可减轻缺氧/复氧诱导的心肌细胞损伤。

The effect of lentivirus mediated mir 6216 on the injury of hypoxia/reoxygenation cardiomyocytes