| VEGF—C真核表达载体的构建和体外表达 |
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| 引用本文： | 董平,刘执玉,毕玉顺,田铧,丁兆习.VEGF—C真核表达载体的构建和体外表达[J].山东医大基础医学院学报,2004,18(3):129-132. |
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| 作者姓名： | 董平 刘执玉 毕玉顺 田铧 丁兆习 |
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| 作者单位： | 山东大学医学院人体解剖学教研室 山东济南250012
(董平，刘执玉，毕玉顺，田铧)，山东大学医学院人体解剖学教研室 山东济南250012(丁兆习) |
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| 基金项目： | 山东省自然科学资金资助项目 (Y2 0 0 2C0 1) |
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| 摘 要： | 目的：构建血管内皮生长因子C(VEGF-C)基因的真核表达栽体，检测其在真核细胞CHO中的表达。方法：根据人VEGF—C cDNA的序列，设计合成一对特异性引物，用RT—PCR法克隆乳腺癌细胞MCF-7VEGF—C基因的cDNA，回收PCR产物连接于克隆载体。扩增，质粒提取，酶切鉴定并进行基因序列鉴定。酶切回收VEGF—C cDNA全长的基因片段，与真核表达栽体pcDNA3．1(-)连接重组质粒进行酶切鉴定。采用脂质体转染法将构建的pcDNA3．1(-)，VEGF-C转染至CHO细胞中，G418加压筛选培养。最后用Westerm—blotting法检测细胞培养上清以及裂解细胞中的VEGF-C蛋白。结果：基因测序证实RT-PCR产物包含VEGF-C cDNA全长。重组peDNA3．1(-)中含 有VEGF—C cDNA全长序列，Westem—blotting检测到细胞培养上清中以及细胞内有VEGF-C蛋白存在。结论：成功构建了人类VEGF-C真核表达载体并检测到载体在真核细胞中的表达。
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| 关 键 词： | 内皮 血管 内皮生长因子 真核细胞 栽体 |
Construction of eukaryotic expression vector for human vascular endothelial growth factor C gene and its expression in vitro |
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| DONG Ping,LIU Zhi-yu,BI Yu-shun,et al.Construction of eukaryotic expression vector for human vascular endothelial growth factor C gene and its expression in vitro[J].Journal of Preclinical Medicine College of Shandong Medical University,2004,18(3):129-132. |
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| Authors: | DONG Ping LIU Zhi-yu BI Yu-shun |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Endothelium vascular Endothelial growth factors Eukaryotic cells Vector |
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