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对白细胞介素-1β激活核转录因子-κB介导A549细胞分泌细胞间黏附分子-1作用的研究
引用本文:廖品琥,杜学柯,黄冰,姚为学,曹建.对白细胞介素-1β激活核转录因子-κB介导A549细胞分泌细胞间黏附分子-1作用的研究[J].中国危重病急救医学,2009,21(3).
作者姓名:廖品琥  杜学柯  黄冰  姚为学  曹建
作者单位:1. 广西医科大学第一附属医院CCU,南宁,530021
2. 广西医科大学附属肿瘤医院麻醉科
基金项目:广西省科技厅留学回国人员基金 
摘    要:目的 研究白细胞介素-1β(IL-1β)对A549细胞表达细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的诱导作用及相关细胞内信号通路的激活和转导机制.方法 以1 μg/L终浓度的IL-1β刺激经SC-514核转录因子-κB(NF-κB)的IKK-2复合物抑制物]预处理的A549细胞,用蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测IL-1β刺激5、10、30、60 min时细胞内磷酸化NF-κB抑制蛋白(pIκBα)和IκBα蛋白表达水平;激光扫描共焦显微镜(LSCM)显像检测NF-κB p65的核转移过程;按试剂盒说明测定NF-κB DNA结合活性;p65抗体染色质免疫沉淀结合聚合酶链反应(ChIP-PCR)技术检测乙酰化组蛋白H4和p65与ICAM-1基因启动子的结合;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测4 h后的ICAM-1 mRNA表达;酶联免疫吸附法(ELISA)检测24 h后细胞表面的ICAM-1蛋白表达.结果 IL-1β刺激后细胞内pIκBα蛋白表达水平明显升高,IκBα蛋白表达水平明显下降;LSCM检测显示激活的p65蛋白从胞质向胞核转移,p65与DNA结合活性明显升高(P<0.01).ChIP-PCR扩增发现,IL-1β促使乙酰化组蛋白H4和p65与ICAM-1基因启动子区域的DNA片断结合.IL-1β刺激4 h后ICAM-1 mRNA表达明显升高,刺激24 h后A549细胞表面ICAM-1蛋白表达亦明显升高(P均<0.01).SC-514阻断了pIκBα蛋白的升高和IκBα蛋白的下降;减少了p65蛋白的核转移和DNA结合活性;降低了ICAM-1的mRNA及蛋白表达水平(P均<0.01).结论 IL-1β通过激活NF-κB 介导了A549细胞表达ICAM-1.

关 键 词:细胞间黏附分子-1  核转录因子-κB  白细胞介素-1β

Effect of activation of nuclear factor-κB on modulation of secretion of intercelluar adhesion molecule-1 by A549 cell
LIAO Pin-hu,DU Xue-ke,HUANG Bing,YAO Wei-xue,CAO Jian.Effect of activation of nuclear factor-κB on modulation of secretion of intercelluar adhesion molecule-1 by A549 cell[J].Chinese Critical Care Medicine,2009,21(3).
Authors:LIAO Pin-hu  DU Xue-ke  HUANG Bing  YAO Wei-xue  CAO Jian
Abstract:
Keywords:intercellular adhesion molecule-1  nuclear factor-κB  interleukin-1β
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