利用新型激光三维成像显微技术分析静止条件下纯化血小板的聚集行为

目的探索利用新型激光三维成像显微技术建立静止条件下纯化血小板聚集行为分析新方法。方法于2017年5月10-15日随机招募12名健康志愿献血者,采集外周血并分离纯化血小板;将血小板悬液滴加在Ⅰ型胶原蛋白表面静止孵育诱导形成血小板聚集体;通过激光三维成像显微系统观察血小板聚集体的三维形态,并测量血小板聚集体体积。结果激光三维成像显微系统能够直观地获取胶原蛋白表面形成的血小板聚集体三维形态、高度分布及体积参数;静止条件下,当血小板密度从20×108/L增加至500×109/L时,血小板聚集体体积从(547.8±30.4)μm~3增加至(5477.8±1106.8)μm~3,但两者间不存在线性关系(P0.05);实验对照组、阿司匹林处理组和盐酸替罗非班处理组血小板聚集体体积分别为(1679.9±49.6)μm~3、(959.9±43.2)μm~3和(645.1±25.1)μm~3,相比对照组,阿司匹林和盐酸替罗非班处理均可抑制血小板聚集体形成,并显著降低血小板聚集体体积(P0.01),且盐酸替罗非班抑制血小板聚集功效强于阿司匹林,形成的血小板聚集体体积具有统计学差异(P0.05);12名不同个体来源的血小板对阿司匹林和盐酸替罗非班的药效响应存在差异(P0.01)。结论本文成功建立了静止条件下纯化血小板聚集行为的激光三维成像分析策略,该技术下一步将用于研究血小板活性、聚集机制和抗血小板药物药效响应的个性化分析。