| 口蹄疫病毒非结构蛋白3B真核表达载体的构建及表达 |
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| 引用本文： | 尤永进,葛艳,陈波,饶忠,徐泉兴,朱彩珠,张强,卢永干.口蹄疫病毒非结构蛋白3B真核表达载体的构建及表达[J].中国预防兽医学报,2003,25(3):168-171. |
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| 作者姓名： | 尤永进 葛艳 陈波 饶忠 徐泉兴 朱彩珠 张强 卢永干 |
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| 作者单位： | 1. 上海市农业遗传育种重点实验室,动物遗传工程研究分室,上海市农业科学院,畜牧兽医研究所,上海,201106
2. 中国农业科学院,兰州兽医研究所,甘肃,兰州,730046 |
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| 摘 要： | 设计、合成FMDV非结构蛋白3B基因的PCR引物，并在引物5’端和3’端分别加入含BamH I和HindⅢ限制性酶切位点序列。以FMDV基因组PNA为模板，利用RT—PCR技术扩增3B基因，得到的基因片段经BamH I/HindⅢ双酶切后与转座载体pFASTBAC HTa连接，转化宿主菌DH10BAC，在含庆大霉索、卡那霉索、X-gal、IPTC的LB平板上37℃培养24h，提取白色菌落，从中提取重组Bacmid 3B，与脂质体共同转染昆虫细胞8f9，得到重组杆状病毒，病毒经传代扩增后感染High5细胞，表达目的蛋白——FMDV非结构蛋白3B。SBS-PAGE及Westem Blot结果显示，本研究成功构建了Bacmid-3B重组表达载体，并在昆虫细胞中表达了NSP—3B蛋白，该表达产物可与MDV感染的猪、牛血清产生免疫反应。
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| 关 键 词： | 口蹄疫病毒 非结构蛋白 真核表达载体 克隆 表达 |
| 文章编号： | 1008-0589(2003)03-0168-04 |
| 修稿时间： | 2002年7月24日 |
Construction and expression of FMDV non-structural protein 3B gene eukaryotic vector |
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| YOU Yon_jin ,GE Yan ,CHEN Bo ,RAO Zhong ,XU Quan_xing ,ZHU Cai_zhu ,ZHANG Qiang ,LU Yong_gan.Construction and expression of FMDV non-structural protein 3B gene eukaryotic vector[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2003,25(3):168-171. |
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| Authors: | YOU Yon_jin GE Yan CHEN Bo RAO Zhong XU Quan_xing ZHU Cai_zhu ZHANG Qiang LU Yong_gan |
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| Affiliation: | YOU Yon_jin 1,GE Yan 1,CHEN Bo 1,RAO Zhong 1,XU Quan_xing 1,ZHU Cai_zhu 2,ZHANG Qiang 2,LU Yong_gan |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | foot_and_mouth disease virus non_structural protein eukaryotic expression vector cloning expression |
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