| 利用CRISPR/Cas9技术敲除斑马鱼核受体PXR基因初探 |
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| 引用本文： | 成凯,冯永永,周莉,李凯彬,聂湘平.利用CRISPR/Cas9技术敲除斑马鱼核受体PXR基因初探[J].中山大学学报(自然科学版),2018(5). |
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| 作者姓名： | 成凯 冯永永 周莉 李凯彬 聂湘平 |
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| 作者单位： | 暨南大学生命科学技术学院生态系//水生生物研究所;中国水产科学研究院珠江水产研究所 |
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| 摘 要： | 孕烷X受体(Pregnane X receptor,PXR)是核受体超家族(NRs)中NR1I的重要成员之一,在保护机体免于内源性和外源性物质损伤方面具有重要作用。利用CRISPR/Cas9基因编辑技术建立PXR基因敲除的斑马鱼模型,为研究环境污染物的毒性机理及代谢过程提供基础模型。根据PXR基因序列,设计gRNA靶位点,体外转录合成gRNA。同时,将设计合成的gRNA与Cas9 mRNA通过显微注射转入斑马鱼受精卵,经孵化、筛选出有效的突变体,并逐代培养杂交筛选出PXR基因敲除突变体。结果表明利用CRISPR/Cas9基因编辑技术成功敲除PXR基因,经测序分析获得稳定的PXR(+4/+4)基因纯合体。
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