| 应用AdEasy腺病毒载体系统构建人骨形成蛋白2基因重组腺病毒 |
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| 引用本文： | 余斌,苏秀云,汪志中,王志芳,张丽芸,卢晓,刘凤玲.应用AdEasy腺病毒载体系统构建人骨形成蛋白2基因重组腺病毒[J].中华实验外科杂志,2005,22(5):583-585. |
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| 作者姓名： | 余斌 苏秀云 汪志中 王志芳 张丽芸 卢晓 刘凤玲 |
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| 作者单位： | 510515,广州,南方医科大学南方医院创伤骨科 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(30170953)，广东省科技计划项目(2002c31302) |
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| 摘 要： | 目的利用AdEasy腺病毒载体系统构建人骨形成蛋白2(BMP2)基因重组腺病毒并在293E细胞中扩增制备重组病毒。方法自人骨形成蛋白2真核表达载体pcDNA3-hBMP2中酶切出hBMP2基因，插入pAdtrackCMV中构建成腺病毒穿梭质粒pAdtrackCMV—hBMP2，经酶切线性化后，采用电穿孔转化到事先电转化腺病毒骨架质粒pAdEasy的BJ5183大肠杆菌电感受态细菌中，挑选同源重组质粒，酶切线性化重组质粒并转染293E细胞包装成重组病毒颗粒，荧光显微镜观察绿色荧光表达。重组病毒上清感染293细胞，荧光显微镜观察绿色荧光表达。结果经限制性内切酶检测和GFP表达证实成功地构建了携带hBMP2基因的重组腺病毒载体并制备出高滴度重组病毒。结论成功地构建了携带hBMP2基因的重组腺病毒载体，为进一步研究rBMP2基因治疗奠定了基础。
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| 关 键 词： | 基因重组腺病毒 人骨形成蛋白2 AdEasy 系统构建 pcDNA3-hBMP2 重组腺病毒载体 BMP2基因 重组病毒 真核表达载体 重组质粒 微镜观察 电穿孔转化 293细胞 GFP表达 穿梭质粒 大肠杆菌 骨架质粒 病毒颗粒 基因治疗 线性化 |
| 修稿时间： | 2004年6月27日 |
Construction of recombinant adenovirus carrying the human bone morphogenetic protein-2 gene using the modified AdEasy system |
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| YU Bing,SU Xiu-yun,WANG Zhi-zhong,et al..Construction of recombinant adenovirus carrying the human bone morphogenetic protein-2 gene using the modified AdEasy system[J].Chinese Journal of Experimental Surgery,2005,22(5):583-585. |
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| Authors: | YU Bing SU Xiu-yun WANG Zhi-zhong |
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| Affiliation: | YU Bing,SU Xiu-yun,WANG Zhi-zhong,et al.Department of Orthopaedics and Traumatology,Nanfang Hospital,Nanfang Medical University,Guangzhou 510515,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Adenovirus Bone morphogenetic protein Gene engineering |
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