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β-1,3-1,4-葡聚糖酶在毕赤酵母中的克隆与表达
引用本文:陈龙军,陈济琛,陈亚兰,林戎斌,林新坚.β-1,3-1,4-葡聚糖酶在毕赤酵母中的克隆与表达[J].食品工业科技,2013,34(10).
作者姓名:陈龙军  陈济琛  陈亚兰  林戎斌  林新坚
作者单位:1. 福建省农业科学院土壤肥料研究所,福建福州,350000
2. 厦门大学化学化工学院,福建厦门,361005
基金项目:福建省农业科学院青年基金,公益性行业(农业)科研专项
摘    要:β-1,3-1,4-D-葡聚糖酶是一类专一性降解β-1,3-1,4-葡糖苷键中的β-1,4-糖苷键,产生小分子还原糖的水解酶,广泛应用于啤酒工业和饲料工业中.本研究根据毕赤酵母密码子偏好性优化β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因序列,采用PCR法将其插入毕赤酵母表达载体pPICZαA,经Sac I线性化后电击整合入毕赤酵母X-33基因组,构建重组酵母;经菌落PCR验证和摇瓶筛选,获得一株X-33/pPICZαA-bgl,甲醇诱导96h后,酶活力达308.5U/mL,经SDS-PAGE电泳,实际蛋白分子量约为33ku.β-1,3-1,4-D-葡聚糖酶最适反应pH为5.0,最适反应温度为50℃.

关 键 词:毕赤酵母X-33  β-1  3-1  4-葡聚糖酶  诱导

Clone and expression of β-1,3-1,4-glucanase in Pichia pastoris
Abstract:
Keywords:
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