β-1,3-1,4-葡聚糖酶在毕赤酵母中的克隆与表达 |
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引用本文: | 陈龙军,陈济琛,陈亚兰,林戎斌,林新坚.β-1,3-1,4-葡聚糖酶在毕赤酵母中的克隆与表达[J].食品工业科技,2013,34(10). |
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作者姓名: | 陈龙军 陈济琛 陈亚兰 林戎斌 林新坚 |
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作者单位: | 1. 福建省农业科学院土壤肥料研究所,福建福州,350000 2. 厦门大学化学化工学院,福建厦门,361005 |
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基金项目: | 福建省农业科学院青年基金,公益性行业(农业)科研专项 |
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摘 要: | β-1,3-1,4-D-葡聚糖酶是一类专一性降解β-1,3-1,4-葡糖苷键中的β-1,4-糖苷键,产生小分子还原糖的水解酶,广泛应用于啤酒工业和饲料工业中.本研究根据毕赤酵母密码子偏好性优化β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因序列,采用PCR法将其插入毕赤酵母表达载体pPICZαA,经Sac I线性化后电击整合入毕赤酵母X-33基因组,构建重组酵母;经菌落PCR验证和摇瓶筛选,获得一株X-33/pPICZαA-bgl,甲醇诱导96h后,酶活力达308.5U/mL,经SDS-PAGE电泳,实际蛋白分子量约为33ku.β-1,3-1,4-D-葡聚糖酶最适反应pH为5.0,最适反应温度为50℃.
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关 键 词: | 毕赤酵母X-33 β-1 3-1 4-葡聚糖酶 诱导 |
Clone and expression of β-1,3-1,4-glucanase in Pichia pastoris |
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Abstract: | |
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