| 重组apo(a) Kringle Ⅳ-10的纯化及生物活性 |
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| 引用本文： | 彭芳芳,洪嘉玲,喻红,汪炳华,殷以礼,李小明.重组apo(a) Kringle Ⅳ-10的纯化及生物活性[J].郑州大学学报(医学版),2002,37(5). |
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| 作者姓名： | 彭芳芳 洪嘉玲 喻红 汪炳华 殷以礼 李小明 |
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| 作者单位： | 武汉大学医学院生物化学教研室,武汉,430071 |
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| 摘 要： | 目的:通过研究重组apo(a) Kringle Ⅳ-10(KⅣ-10) 的赖氨酸结合能力对纤溶酶原与内皮细胞结合的影响,探讨apo(a)在抑制纤溶过程中的作用,为Lp(a)致动脉粥样硬化机制研究提供依据.方法:将含apo (a) 野生型KⅣ-10 (wt-KⅣ-10 / Trp72)和突变型KⅣ-10 (mut-KⅣ-10/Arg72)基因片段的重组质粒,分别转化至E.coli DH5α菌株中并表达含这2个重组片段的融合蛋白,通过Glutathione-Agarose beads亲和层析进行分离和提纯,经L-Lys-Sepharose 4B亲和层析检测其赖氨酸结合能力.再以异硫氰酸荧光素标记的纤溶酶原为配基,观察这2种基因表达片段对纤溶酶原与人脐静脉内皮细胞结合的影响.结果:实验结果显示:在E.coli DH5α菌株中表达的GST-wt-KⅣ-10/Trp72能有效抑制纤溶酶原与人脐静脉内皮细胞的结合;而GST-mut-KⅣ-10/Arg72在任一浓度范围内均无这种抑制作用.结论:apo (a) KⅣ-10对纤溶的抑制作用与其赖氨酸结合能力密切相关;而KⅣ-10的赖氨酸的结合能力与其赖氨酸结合位点中的Trp72有关.
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| 关 键 词： | 内皮细胞 纤溶酶原 apo(a) Kringle Ⅳ-10 赖氨酸结合位点 |
Purification of recombinant apolioprotein (a) Kringle Ⅳ-10 and its biological activity |
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