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图像流式细胞仪在中华绒螯蟹血细胞分群及吞噬功能研究中的应用
引用本文:胡锦丽,任星潮,刘逸尘,孙金生,耿绪云,张亦陈.图像流式细胞仪在中华绒螯蟹血细胞分群及吞噬功能研究中的应用[J].水产学报,2019,43(3):563-572.
作者姓名:胡锦丽  任星潮  刘逸尘  孙金生  耿绪云  张亦陈
作者单位:天津师范大学生命科学学院, 天津市动植物抗性重点实验室, 天津 300387,天津师范大学生命科学学院, 天津市动植物抗性重点实验室, 天津 300387,天津师范大学生命科学学院, 天津市动植物抗性重点实验室, 天津 300387,天津师范大学生命科学学院, 天津市动植物抗性重点实验室, 天津 300387,天津市水产研究所, 天津 300221,天津师范大学生命科学学院, 天津市动植物抗性重点实验室, 天津 300387
基金项目:国家自然科学基金(31472299);天津市应用基础与前沿技术研究计划(15JCZDJC33800);天津市水产生态及养殖重点实验室开放基金(TJAE2015005);天津市人才发展特殊支持计划高层次创新创业团队项目(ITTFRS2017007); 天津市高等学校创新团队建设规划(TD13-5076)
摘    要:为了更精确地对甲壳动物血细胞进行快速分类和功能分析,本研究以中华绒螯蟹为例,依据其血细胞内具有颗粒结构的特征,与常规显微观察对比,探讨了一种基于图像流式细胞仪的血细胞自动化分类新方法,并测量了体质量为(10±3) g的中华绒螯蟹的血细胞对直径1μm微球的吞噬情况。结果显示,两种方法都可将中华绒螯蟹血细胞分为4个类群。显微镜观察分类基于胞内可见颗粒,但由于缺乏精细的量化标准,批次样品的人工辨识结果波动较大;而图像流式方法以胞内全部颗粒结构为对象,利用高精度检测模块测量,结果更准确、客观,而且通量高、重复性好。测量结果显示,中华绒螯蟹血淋巴中无颗粒、小颗粒、中颗粒及大颗粒细胞占比分别为40.62%±2.65%、36.68%±6.84%、7.80%±1.16%和16.51%±5.60%,依据测量的颗粒特征区分的4个类群界限清晰,缺乏过渡样点,提示各类细胞之间可能没有相互转化。进一步的活体微球吞噬实验证实,中华绒螯蟹的4类血细胞都具有吞噬功能,并以无颗粒细胞为主要吞噬类群;吞噬微球的细胞比例在注射后6 h内呈钟型曲线变化,4 h可达峰值(5.69%±0.44%),表明中华绒螯蟹血细胞能高效清除血淋巴中的异物。研究表明,图像流式细胞仪适合于中华绒螯蟹的血细胞分类分析和功能研究,本研究结果为同类研究提供了重要参考,将有助于更全面了解甲壳动物血细胞的功能。

关 键 词:中华绒螯蟹  血细胞  分类  吞噬  图像流式细胞仪
收稿时间:2018/7/26 0:00:00
修稿时间:2018/10/21 0:00:00

Application of imaging flow cytometry in studies of the classification and phagocytic function of Eriocheir sinensis blood cell
HU Jinli,REN Xingchao,LIU Yichen,SUN Jinsheng,GENG Xuyun and ZHANG Yichen.Application of imaging flow cytometry in studies of the classification and phagocytic function of Eriocheir sinensis blood cell[J].Journal of Fisheries of China,2019,43(3):563-572.
Authors:HU Jinli  REN Xingchao  LIU Yichen  SUN Jinsheng  GENG Xuyun and ZHANG Yichen
Affiliation:Tianjin Key Laboratory of Animal and Plant Resistance, College of Life Science, Tianjin Normal University, Tianjin 300387, China,Tianjin Key Laboratory of Animal and Plant Resistance, College of Life Science, Tianjin Normal University, Tianjin 300387, China,Tianjin Key Laboratory of Animal and Plant Resistance, College of Life Science, Tianjin Normal University, Tianjin 300387, China,Tianjin Key Laboratory of Animal and Plant Resistance, College of Life Science, Tianjin Normal University, Tianjin 300387, China,Tianjin Aquatic Animal Infectious Disease Control and Prevention Center, Tianjin 300221, China and Tianjin Key Laboratory of Animal and Plant Resistance, College of Life Science, Tianjin Normal University, Tianjin 300387, China
Abstract:
Keywords:Eriocheir sinensis  blood cell  classification  phagocyte  imaging flow cytometry
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