| 水稻线粒体tRNATrp的种属特异性氨酰化 |
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| 引用本文： | 金晓玲.水稻线粒体tRNATrp的种属特异性氨酰化[J].科学通报,2006,51(7):827-832. |
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| 作者姓名： | 金晓玲 |
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| 作者单位： | 金晓玲（浙江师范大学化学与生命科学学院,金华,321004;中南林学院环艺学院,长沙,410004）;陶志坚（浙江师范大学化学与生命科学学院,金华,321004）;贾捷（中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所,分子生物学国家重点实验室,上海,200033）;何新霞（浙江师范大学化学与生命科学学院,金华,321004）;金由辛（中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所,分子生物学国家重点实验室,上海,200033） |
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| 基金项目： | 本工作为浙江省自然科学基金资助项目(批准号:302103). |
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| 摘 要： | 为了研究原核生物和真核生物(细胞质)色氨酰tRNA合成酶(TrpRS)对线粒体tRNATrp识别的种属特异性, 构建了7个水稻线粒体tRNATrp三位点(G73, U72, A68)的单点或多点突变的突变体. 这些突变基因, 经体外转录后分别用枯草杆菌(B. subtilis)和人色氨酰tRNA合成酶(TrpRS)进行氨酰化反应, 并测定它们的动力学常数. 结果表明, 与野生型水稻线粒体tRNATrp相比, 7个突变体的转录产物被B. subtilis TrpRS氨酰化的活力分别降低了53.33%~99.79%, 被人TrpRS氨酰化的活力却分别提高了4~330倍, 其中以MPH7(水稻线粒体tRNATrp的三碱基(G73, U72 和C68)全部突变为人tRNATrp的三碱基序列)的氨酰化活力改变最大. 实验结果证明, 与真核生物和原核生物细胞质tRNATrp的种族特异性类似, 水稻线粒体 tRNATrp的种属特异性元件也主要处于氨基酸接受茎的识别位碱基、第一和第五对碱基对, 亦即识别位碱基G73, 氨基酸接受茎上的两个碱基对G1/U72和U5/A68. 本研究为线粒体 tRNATrp起源于真细菌的推论提供了实验依据.
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| 关 键 词： | 种属特异性氨酰化 色氨酸tRNA 色氨酰tRNA合成酶 水稻 线粒体 |
| 收稿时间： | 2005-08-03 |
| 修稿时间： | 2005年11月21 |
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