大鼠腹膜间皮细胞原代培养方法

目的：探讨大鼠腹膜间皮细胞（RPMC）原代培养方法。方法：采用胰蛋白酶-EDTA消化法,从大鼠的腹膜组织中分离RPMC。倒置相差显微镜对细胞进行形态学观察及鉴定;免疫组化法进行鉴定。采用免疫组化法检测广谱抗细胞角蛋白（PCK）抗体、抗波形蛋白（Vim）抗体、抗白细胞CD45抗体、抗第Ⅷ因子相关抗体的表达。结果：倒置相差显微镜示细胞融合后贴壁的细胞均能完全伸展,细胞形态多种多样,椭圆形、梭形、多角形,细胞大小不一,约7～9d,细胞生长达融合状态,立即呈现典型的＂铺路石样＂外观。免疫组化结果示RPMC角蛋白抗体、波形蛋白抗体表达阳性,抗白细胞CD45抗体、抗第Ⅷ因子相关抗体表达阴性。结论：RPMC原代培养方法,可获得纯度高,数量较多的腹膜间皮细胞,可为进一步研究腹膜透析腹膜纤维化的防治提供实验基础。