柴胡-黄芩药对的不同分离部位对H_2O_2刺激肝星状细胞增殖的影响

目的:研究柴胡-黄芩药对的不同分离部位对过氧化氢(H_2O_2)刺激的肝星状细胞增殖的影响,探讨柴胡-黄芩药对抗肝纤维化主要药效物质基础。方法:柴胡-黄芩水提液经D101型大孔吸附树脂吸附,依次用水、30%、60%和90%的乙醇梯度洗脱,分别得到水洗脱部位(A)、30%乙醇洗脱部位(B)、60%乙醇洗脱部位(C)及90%乙醇洗脱部位(D)。体外培养肝星状细胞,采用不同浓度的H_2O_2刺激肝星状细胞增殖,筛选最佳造模浓度,然后用柴胡-黄芩药对水提液及A、B、C、D的高、中、低剂量组进行干预24 h。采用MTT法测定各组肝星状细胞的抑制情况;应用ELISA法检测细胞上清液中透明质酸酶(hy-aluronidase,HA)、层黏连蛋白(laminin,LN)、Ⅲ型前胶原(procollagenⅢ,PCⅢ)、Ⅳ型胶原(collagen typeⅣ,Ⅳ-C)的浓度。结果:结果显示,5μmol/L的H_2O_2能显著刺激肝星状细胞增殖,柴胡-黄芩药对及其各分离部位对H_2O_2刺激的肝星状细胞增殖均具有一定的抑制作用,而且能够将低HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C的细胞释放水平,具有剂量相关性,其中B、C高剂量组对其抑制作用最为明显,有统计学意义(P0.01)。结论:柴胡-黄芩药对及其30%、60%乙醇洗脱部位对H_2O_2刺激的肝星状细胞增殖均具有一定的抑制作用,30%、60%乙醇洗脱部位可能是柴胡-黄芩药对抗肝纤维化主要有效部位。