重组pcDNA3.0-FGF10的构建及其转染人间充质干细胞的生物学表达 |
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引用本文: | 张迅轶,尹喆,沈智君,冯云,杨敏,陈子昂,纪亚忠.重组pcDNA3.0-FGF10的构建及其转染人间充质干细胞的生物学表达[J].检验医学与临床,2019,16(24). |
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作者姓名: | 张迅轶 尹喆 沈智君 冯云 杨敏 陈子昂 纪亚忠 |
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作者单位: | 同济大学附属同济医院生殖医学科,上海,200065 |
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基金项目: | 同济大学附属同济医院临床研究培育项目 |
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摘 要: | 目的构建成纤维细胞生长因子10(FGF10)的载体pcDNA3.0-FGF10,观察FGF10在体内外的生物学作用。方法人早胚组织总RNA,扩增得到人FGF10cDNA片段并将其插入载体pcDNA3.0中,构建成pcDNA3.0-FGF10重组真核表达载体。将其转染入人胚源间充质干细胞(MSC),得到pcDNA3.0-FGF10-MSC。利用免疫荧光、反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、Western-blot等方法鉴定转染效果。结果成功构建能持续稳定表达目的蛋白FGF10的重组质粒表达载体pcDNA3.0-FGF10-MSC。结论成功构建并转染质粒载体,为观察FGF10在体内外的生物学作用提供了实验工具。
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关 键 词: | 成纤维细胞生长因子10 间充质干细胞 转染 |
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