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重组pcDNA3.0-FGF10的构建及其转染人间充质干细胞的生物学表达
引用本文:张迅轶,尹喆,沈智君,冯云,杨敏,陈子昂,纪亚忠.重组pcDNA3.0-FGF10的构建及其转染人间充质干细胞的生物学表达[J].检验医学与临床,2019,16(24).
作者姓名:张迅轶  尹喆  沈智君  冯云  杨敏  陈子昂  纪亚忠
作者单位:同济大学附属同济医院生殖医学科,上海,200065
基金项目:同济大学附属同济医院临床研究培育项目
摘    要:目的构建成纤维细胞生长因子10(FGF10)的载体pcDNA3.0-FGF10,观察FGF10在体内外的生物学作用。方法人早胚组织总RNA,扩增得到人FGF10cDNA片段并将其插入载体pcDNA3.0中,构建成pcDNA3.0-FGF10重组真核表达载体。将其转染入人胚源间充质干细胞(MSC),得到pcDNA3.0-FGF10-MSC。利用免疫荧光、反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、Western-blot等方法鉴定转染效果。结果成功构建能持续稳定表达目的蛋白FGF10的重组质粒表达载体pcDNA3.0-FGF10-MSC。结论成功构建并转染质粒载体,为观察FGF10在体内外的生物学作用提供了实验工具。

关 键 词:成纤维细胞生长因子10  间充质干细胞  转染
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