| 翼首草鲨烯合酶（PhSQS2）全长克隆、表达特性分析及蛋白功能验证 |
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| 引用本文： | 王芸,吴宇,蒋庆锋,何焱,兰小中,张磊.翼首草鲨烯合酶（PhSQS2）全长克隆、表达特性分析及蛋白功能验证[J].中草药,2022,53(21):6840-6847. |
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| 作者姓名： | 王芸 吴宇 蒋庆锋 何焱 兰小中 张磊 |
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| 作者单位： | 上海大学医学院生物医药创新研发中心, 上海 200444;海军军医大学药学院 药用植物学教研室, 上海 200433;西藏军区总医院 医疗保障中心药剂科, 西藏 拉萨 850000;海军军医大学药学院 药用植物学教研室, 上海 200433;西藏农牧学院 西南大学药用植物联合研发中心, 西藏 林芝 860000 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目（31970316）；上海市优秀学术带头人计划（19XD1405000） |
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| 摘 要： | 目的 从匙叶翼首草Pterocephalus hookeri转录组中挖掘参与三萜合成的鲨烯合酶（squalene synthase，SQS）并研究其作用机制。方法 以翼首草基原植物匙叶翼首草为研究对象，基于前期转录组数据筛选克隆PhSQS2基因，并进行生物信息学分析；通过烟草瞬时转化实验观察PhSQS2亚细胞定位情况，利用实时荧光定量PCR分析PhSQS2在不同器官中的表达特征；构建原核表达载体经体外酶促反应鉴定PhSQS2功能。结果 PhSQS2基因开放阅读框（open reading frame，ORF）区域全长1242 bp编码414个氨基酸，蛋白相对分子质量为47 400，理论等电点为6.57，总平均疏水性为-0.075，为不稳定蛋白。PhSQS2主要定位在细胞核和细胞质中；组织分布具有特异性，在根和叶中均有表达，叶中表达量显著高于根中。体外酶促实验证明PhSQS2催化法尼基焦磷酸生成鲨烯。结论 PhSQS2的功能鉴定为解析翼首草中萜类物质生物合成途径，提高三萜皂苷类成分含量及优质种质资源筛选培育提供了前期理论基础。
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| 关 键 词： | 匙叶翼首草 翼首草 鲨烯合酶(PhSQS2) 生物信息学 表达特性 基因功能 |
| 收稿时间： | 2022/4/3 0:00:00 |
Cloning, expression pattern and functional analysis of squalene synthase (PhSQS2) in Pterocephali Herba |
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| WANG Yun,WU Yu,JIANG Qing-feng,HE Yan,LAN Xiao-zhong,ZHANG Lei.Cloning, expression pattern and functional analysis of squalene synthase (PhSQS2) in Pterocephali Herba[J].Chinese Traditional and Herbal Drugs,2022,53(21):6840-6847. |
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| Authors: | WANG Yun WU Yu JIANG Qing-feng HE Yan LAN Xiao-zhong ZHANG Lei |
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| Affiliation: | Biomedical Innovation R&D Center, School of Medicine, Shanghai University, Shanghai 200444, China;Department of Pharmaceutical Botany, School of Pharmacy, Second Military Medical University, Shanghai 200433, China;Pharmacy Department, Medical Security Center, General Hospital of Tibet Military Region, Lhasa 850000, China;Department of Pharmaceutical Botany, School of Pharmacy, Second Military Medical University, Shanghai 200433, China;Animal Husbandry College and TAAHC-SWU Medicinal Plant R&D Centre, Tibet Agricultural and Animal Husbandry University, Nyingchi 860000, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Pterocephalus hookeri (C B Clarke) Hö eck Pterocephali Herba squalene synthase (PhSQS2) bioinformatics analysis expression pattern gene function |
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