| 2种PCR方法扩增大豆rbcS启动子5'侧翼序列比较 |
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| 引用本文： | 刘晓庆,丁志鑫,刘晶,崔喜艳.2种PCR方法扩增大豆rbcS启动子5'侧翼序列比较[J].吉林农业大学学报,2011,33(5). |
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| 作者姓名： | 刘晓庆 丁志鑫 刘晶 崔喜艳 |
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| 作者单位： | 吉林农业大学生命科学学院,长春,130118 |
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| 基金项目： | 国家转基因生物新品种培育重大专项，吉林省教育厅“十一五”科学技术研究项目 |
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| 摘 要： | 比较了扩增已知序列5’侧翼序列的2种PCR方法.方法一是反向PCR (IPCR),以大豆基因组酶切后的DNA片段自身环化产物做模板,用2对特异引物反向扩增大豆rbcS启动子5'侧翼序列.方法二是热不对称交错PCR(rAIL- PCR),以大豆基因组DNA为模板,用3个巢武特异性引物分别和简并引物组合进行连续的PCR循环.IPCR和TAIL- PCR 2种试验方法分别扩增获得438 bp和867 bp特异产物.经测序发现:2片段两侧均含有设计的引物,其部分序列均与已知序列相一致,两者也有部分序列完全相同,但TAIL- PCR技术简单,重复性好,能够在短时间内获得目标片段,TAIL-PCR技术在克隆侧翼序列时优于IPCR.
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| 关 键 词： | 反向PCR 热不对称交错PCR 大豆 rbcS启动子 |
Comparison between Two PCR Techniques for Amplifying the 5' Flanking Sequence of the rbcS Promoter from Glycine max |
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| LIU Xiao-qing,DING Zhi-xin,LIU Jing,CUI Xi-yan.Comparison between Two PCR Techniques for Amplifying the 5' Flanking Sequence of the rbcS Promoter from Glycine max[J].Journal of Jilin Agricultural University,2011,33(5). |
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| Authors: | LIU Xiao-qing DING Zhi-xin LIU Jing CUI Xi-yan |
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