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重组腺相关病毒介导的大鼠脂联素载体的构建与鉴定
引用本文:李强翔,钟惠菊,盛杰,李果,张颖,申道君,王敏.重组腺相关病毒介导的大鼠脂联素载体的构建与鉴定[J].现代生物医学进展,2008,8(3):430-433.
作者姓名:李强翔  钟惠菊  盛杰  李果  张颖  申道君  王敏
作者单位:1. 中南大学湘雅医院内分泌科,湖南,长沙,410008
2. 娄底市中心医院,湖南,娄底,417000
基金项目:国家自然科学基金 , 湖南省自然科学基金
摘    要:目的:克隆大鼠脂联素基因(Acrp30),并对载有脂联素的重组腺相关病毒(AAV)载体进行构建及鉴定.方法:根据Acrp30的基因序列设计引物,上游引入EcoR Ⅰ位点,下游引入Sal Ⅰ位点,以EX-A0242-M01-Acrp30为模板扩增目的基因.将Acrp30基因克隆入pUC19载体中,获得重组质粒pUC19-Acrp30.然后用EcoR Ⅰ与sal Ⅰ酶切pUC19-Acrp30及质粒pSNAV,回收酶切片段,T4DNA连接酶16℃过夜,转化大肠杆菌DH5a感受肽细胞,筛选阳性克隆获得pSNAV-Acrp30,EcoR Ⅰ/Sal双酶切鉴定,并行全基因测序.结果:PCR电泳及酶切鉴定表明,pSNAV-Acrp30重组成功,基因测序显示装入pSNAV质粒中的Acrp30基因正确.结论:脂联素病毒栽体成功构建,可以满足脂联素基因研究和治疗的需要.

关 键 词:基因  脂联素  腺相关病毒  重组质粒  腺相关  病毒  大鼠  脂联素  载体  构建与鉴定  Adiponectin  Vector  Virus  Recombinant  Identification  治疗  基因研究  栽体  显示  全基因测序  组成  电泳  结果
文章编号:1673-6273(2008)03-0430-03
修稿时间:2007年12月25

Construction and Identification of the Recombinant Adeno-associated Virus Vector with Adiponectin
LI Qiang-xiang,ZHONG Hui-ju,SHENG Jie,LI Guo,ZHANG Ying,SHEN Daojun,WANG Ming.Construction and Identification of the Recombinant Adeno-associated Virus Vector with Adiponectin[J].Progress in Modern Biomedicine,2008,8(3):430-433.
Authors:LI Qiang-xiang  ZHONG Hui-ju  SHENG Jie  LI Guo  ZHANG Ying  SHEN Daojun  WANG Ming
Abstract:
Keywords:
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